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南方科技大学公共卫生及应急管理学院2026级博士研究生招生报考通知(长期有效)
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liaoyh

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】紧急求助已有4人参与

我这几天在提取拟南芥的基因组dna,用异丙醇后可以看到有沉淀,但当用琼脂糖电泳检测的时候总看不到条带,不知道是什么原因,请大家指导指导
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liaoyh

铁杆木虫 (正式写手)

我用的是ctab法提取的,步骤是:1,液氮研磨,加入ctab和巯基乙醇,2,65度加热90分钟,3,加入等体积酚/ 氯仿(1:1)摇匀,8000rpm离心2分钟,4, 吸取上清,转移到一新离心管中,加入两倍体积的无水乙醇和乙酸钠,零下20度放一小时,5, 12000离心10分钟,这时候可以看到白色沉淀(但不知道是不是dna),而后用酒精洗涤,6, 加无菌水溶解。而后勇琼脂糖凝胶电泳检查,看不到条带,以前提的时候是可以看到的,只是这次题的看不到,自己还没找到时什么原因,还有,就是那个酚是不是用tris-酚?实验室已经配好的酚已经变成红色,好像已经氧化了
5楼2010-04-19 13:15:53
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