| 查看: 2860 | 回复: 9 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
【求助/交流】关于电转 已有5人参与
|
|||
|
我最近做一阴性菌的电击转化，一直没转进去，平板都是电转三天后才长出来好多菌落，提不出质粒，认为可能是抗生素失效的原因，对于电转有如下几个问题需要向各位请教： 1） 文献里一般的点击电压为1.5-2.4KV之间，我试过1.5、1.8、2.0、2.5KV电压下，25uF,200-400之间不同欧姆，都没有结果，不知道是为什么，我不是要提高转化效率，只是转进去就行了，现在很困惑 2） 电转可以从质粒上进行优化么，例如线性化或者加热or冰浴？ 3） 做电转感受态，一般用的是10%的甘油，有的好像要加盐离子如MgCl2,CaCl2等，这些加的都是二价的，我查的文献里，有的要加0.85%的NaCl，有的不要，我试着加过一次，爆杯现象很严重（不知道是不是我加的量不是很精确，不过我想应该不会），想问问一价离子和二价离子区别大么，如果不加对转化效率影响大不大 有哪位做过的帮帮我吧，不胜感激 |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有199人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
匿名
用户注销 (著名写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 39 (小学生)
- 金币: 8889.9
- 红花: 4
- 帖子: 2365
- 在线: 346.5小时
- 虫号: 0
- 注册: 2007-11-13
- 专业: 植物病理学
9楼2010-04-20 17:35:00
天使托
专家顾问 (职业作家)
T.Shen
-
专家经验: +57 - MolEPI: 106
- 应助: 95 (初中生)
- 贵宾: 0.263
- 金币: 16299.3
- 散金: 593
- 红花: 74
- 沙发: 9
- 帖子: 3659
- 在线: 290.6小时
- 虫号: 441757
- 注册: 2007-10-27
- 专业: 微生物生理与生物化学
- 管辖: 微生物
2楼2010-04-17 23:58:54
匿名
用户注销 (著名写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 39 (小学生)
- 金币: 8889.9
- 红花: 4
- 帖子: 2365
- 在线: 346.5小时
- 虫号: 0
- 注册: 2007-11-13
- 专业: 植物病理学
3楼2010-04-18 05:28:22
j2
木虫 (正式写手)
- 应助: 56 (初中生)
- 金币: 3797.8
- 散金: 2
- 红花: 4
- 帖子: 688
- 在线: 108.8小时
- 虫号: 452275
- 注册: 2007-11-05
- 性别: MM
- 专业: 卫生检验
4楼2010-04-18 09:56:05
40