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【求助/交流】关于电转 已有5人参与
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我最近做一阴性菌的电击转化，一直没转进去，平板都是电转三天后才长出来好多菌落，提不出质粒，认为可能是抗生素失效的原因，对于电转有如下几个问题需要向各位请教： 1） 文献里一般的点击电压为1.5-2.4KV之间，我试过1.5、1.8、2.0、2.5KV电压下，25uF,200-400之间不同欧姆，都没有结果，不知道是为什么，我不是要提高转化效率，只是转进去就行了，现在很困惑 2） 电转可以从质粒上进行优化么，例如线性化或者加热or冰浴？ 3） 做电转感受态，一般用的是10%的甘油，有的好像要加盐离子如MgCl2,CaCl2等，这些加的都是二价的，我查的文献里，有的要加0.85%的NaCl，有的不要，我试着加过一次，爆杯现象很严重（不知道是不是我加的量不是很精确，不过我想应该不会），想问问一价离子和二价离子区别大么，如果不加对转化效率影响大不大 有哪位做过的帮帮我吧，不胜感激 |
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9楼2010-04-20 17:35:00
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