应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于电转
51/1返回列表
查看: 2635  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

漫迹

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于电转 已有5人参与

我最近做一阴性菌的电击转化，一直没转进去，平板都是电转三天后才长出来好多菌落，提不出质粒，认为可能是抗生素失效的原因，对于电转有如下几个问题需要向各位请教：
1） 文献里一般的点击电压为1.5-2.4KV之间，我试过1.5、1.8、2.0、2.5KV电压下，25uF,200-400之间不同欧姆，都没有结果，不知道是为什么，我不是要提高转化效率，只是转进去就行了，现在很困惑
2） 电转可以从质粒上进行优化么，例如线性化或者加热or冰浴？
3） 做电转感受态，一般用的是10%的甘油，有的好像要加盐离子如MgCl2,CaCl2等，这些加的都是二价的，我查的文献里，有的要加0.85%的NaCl，有的不要，我试着加过一次，爆杯现象很严重（不知道是不是我加的量不是很精确，不过我想应该不会），想问问一价离子和二价离子区别大么，如果不加对转化效率影响大不大
    有哪位做过的帮帮我吧，不胜感激
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2010-04-17 22:11:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

j2

木虫 (正式写手)
★
1949stone(金币+1): 2010-04-18 14:28
同样电转化失败ing~~~~
电转化还是少点盐离子比较好，会爆，也会影响转化
赞一下(1人) 回复此楼
修炼ｉｎｇ，当虫仙……
4楼2010-04-18 09:56:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★ ★
scelab(金币+2):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-04-18 01:43
漫迹(金币+1): 2010-04-18 10:20
1：一般是2300V（我们是这样）
2:可以将质粒的量提高！
3：我们用的是SOC
赞一下(1人) 回复此楼
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
2楼2010-04-17 23:58:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (著名写手)
★ ★
漫迹(金币+1): 2010-04-18 10:20
amisking(金币+2): 2010-04-18 13:07
本帖仅楼主可见
赞一下
3楼2010-04-18 05:28:22
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

漫迹

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2010-04-17 23:58:54:
1：一般是2300V（我们是这样）
2:可以将质粒的量提高！
3：我们用的是SOC

请问你用的SOC 是复苏培养基还是感受态制备时的缓冲液，能分享下配方么，谢了
赞一下 回复此楼
5楼2010-04-18 10:21:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 284求调剂 +4 Zhao anqi 2026-03-22 4/200 2026-03-22 16:14 by lature00
[考研] 305分求调剂（食品工程） +4 Sxy112 2026-03-21 6/300 2026-03-22 15:26 by 无懈可击111
[考研] 一志愿中南大学化学学硕0703总分337求调剂 +3 niko- 2026-03-22 3/150 2026-03-22 15:15 by 杨杨杨紫
[考研] 求调剂 +3 .m.. 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:25 by barlinike
[考研] 070300化学319求调剂 +7 锦鲤0909 2026-03-17 7/350 2026-03-21 03:46 by JourneyLucky
[考研] 265求调剂 +9 梁梁校校 2026-03-17 9/450 2026-03-21 02:17 by JourneyLucky
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境专硕，总分308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:39 by JourneyLucky
[考研] 22408 344分 求调剂 一志愿 华电计算机技术 +4 solanXXX 2026-03-20 4/200 2026-03-20 23:49 by alg094825
[考研] 321求调剂 +9 何润采123 2026-03-18 11/550 2026-03-20 23:19 by JourneyLucky
[考研] 药学383 求调剂 +3 药学chy 2026-03-15 5/250 2026-03-20 22:11 by 云游重阳
[考研] 290求调剂 +7 ^O^乜 2026-03-19 7/350 2026-03-20 21:43 by JourneyLucky
[考研] 295材料求调剂，一志愿武汉理工085601专硕 +5 Charlieyq 2026-03-19 5/250 2026-03-20 20:35 by JourneyLucky
[考研] 招收调剂硕士 +4 lidianxing 2026-03-19 12/600 2026-03-20 12:25 by lidianxing
[考研] 081700化工学硕调剂 +3 【1】 2026-03-16 3/150 2026-03-19 23:40 by edmund7
[考研] 085600材料与化工求调剂 +6 绪幸与子 2026-03-17 6/300 2026-03-19 13:27 by houyaoxu
[考研] 材料考研调剂 +3 xwt。 2026-03-19 3/150 2026-03-19 11:22 by w沐阳w
[考研] 290求调剂 +3 p asserby. 2026-03-15 4/200 2026-03-17 16:35 by wangkm
[考博] 26申博 +4 八6八68 2026-03-16 4/200 2026-03-17 13:00 by 轻松不少随
[考研] 11408 一志愿西电，277分求调剂 +3 zhouzhen654 2026-03-16 3/150 2026-03-17 07:03 by laoshidan
[考研] [导师推荐]西南科技大学国防/材料导师推荐 +3 尖角小荷 2026-03-16 6/300 2026-03-16 23:21 by 尖角小荷
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭