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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】寻高手解答：提取质粒老是降解怎么回事？
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fywjp

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】寻高手解答：提取质粒老是降解怎么回事？ 已有8人参与

寻高手解答：提取质粒老是降解怎么回事？
我是提取大肠杆菌质粒PET28a，每次都是，用含RNA酶的TE溶了之后就很明显的降解了，怎么回事啊？请高手指教，我应该注意什么，谢谢
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1楼 2010-04-16 21:37:54
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fywjp

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2010-04-30 16:02:11:
就是，你手上有那么多DNASE，那可以去卖了,我觉得你直接用水溶解～做个对照看看，RNASE一定要使劲的煮～希望对你有所帮助～

谢谢赐教，但不必用这种语气吧。RNASE里是含有DNASE酶，我晓得的，在它的最适温度下加热10min应该说也是没有问题的，而DNASE在这个温度下活性很小应该说不会造成质粒的降解。
而那次我的质粒它就降解了。
不过现在不存在这个问题了
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11楼2010-05-01 09:48:12
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scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+1): 2010-04-17 12:02
宿主菌有核酸降解酶存在
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小木虫之有关部门负责人
2楼2010-04-16 22:06:50
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scelab

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫之有关部门负责人
你提质粒过程中用氛氯仿抽屉两边就ok啦
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小木虫之有关部门负责人
3楼2010-04-16 22:21:23
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段家一凡

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
很可能是你的RNAase没有煮沸处理，还有DNAase活性。你可以用一般的TE或水溶解，然后检测是否还降解。
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4楼2010-04-17 00:47:51
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