应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】westernbloy问题
131/2返回列表12下一页
查看: 658  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 liyong1981 的 1 个金币

liyong1981

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】westernbloy问题 已有6人参与

如题

我马上要做两个蛋白一个大概90K，一个大概38K，我想一般SDS胶跑，请问高手，分离胶和积层胶浓度大概用多大的？还有，我转印 的时候能在一张膜上么？多长时间呢？谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2010-04-15 09:07:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

antibody01

金虫 (著名写手)
★ ★
liyong1981(金币+1):谢谢参与
scelab(金币+1):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-04-15 11:53
我通常用4-20的梯度胶做分离胶，转印可以在一张膜上的。
赞一下(2人) 回复此楼
生活就像强奸，无法反抗就要学会享受； 工作就像轮奸，你不行就要别人上； 社会就像自慰，一切都要靠自己的双手解决。
2楼2010-04-15 09:39:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
★ ★
liyong1981(金币+1):谢谢参与
scelab(金币+1):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-04-15 11:53
浓度影响不大，能分开的，

一张膜也没问题，选择相同的一抗来源就行
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2010-04-15 10:00:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)
分离胶不是有个线性范围么？大概哟哦那个多大呢？我上次用的6%的胶，SDS跑的MARKER都很不好
赞一下 回复此楼
4楼2010-04-15 10:45:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Aileenwarner

铁虫 (初入文坛)
★ ★
liyong1981(金币+1):谢谢参与
scelab(金币+1):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-04-15 11:54
我跑过20~80KD的全蛋白，用12.5%分离胶，4.5%浓缩胶，效果不错，低分子量MARKER跑得也很好，供你参考。
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2010-04-15 10:59:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qrf0704

铁虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我做的时候，用12%的分离胶，5%浓缩胶，MARKER跑的很好，低分子量高分子亮的都不错，你可以参考，转膜转到一张上面没有问题。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2010-04-15 12:52:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)
谢谢大家，再有我想知道，有没有做过抗体库的朋友，是这样的，我现在设计了个模板，想在TG1和HB2151中表达，如果能表达我的SCFV，我就可以下一步设计随机引物了，我的问题是，我不用M13噬菌体超感染，只用IPTG诱导，SDS裂解，westernblot能看出来么？
赞一下 回复此楼
7楼2010-04-15 13:18:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)
补充一下，我用的载体是pCANTAB5,求高手解答
赞一下 回复此楼
8楼2010-04-15 13:27:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)
求高手解答
回复此楼
9楼2010-04-15 13:44:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雪山飞狐7233

铁杆木虫 (著名写手)

铁杆小虫
★
liyong1981(金币+1):谢谢参与
12%分离胶  4%浓缩胶完全可以满足了。
赞一下(1人) 回复此楼
梦在路就在！
10楼2010-04-15 13:46:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 liyong1981 的主题更新
131/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿厦大0856，306求调剂 +12 Bblinging 2026-04-11 12/600 2026-04-11 20:19 by liyun12321
[考研] 化学308分求调剂 +22 你好明天你好 2026-04-07 24/1200 2026-04-11 11:14 by ChemPharm
[考研] 283求调剂，工科！ +12 苏打水7777 2026-04-08 12/600 2026-04-11 10:28 by 逆水乘风
[考研] 080100力学316求调剂 +8 L_Hairui 2026-04-07 8/400 2026-04-11 10:00 by zhq0425
[考研] 22408 366分，本科211，一志愿西工大 +4 Rubt 2026-04-09 4/200 2026-04-10 19:51 by chemisry
[考研] 071000生物学调剂求助 +17 zzzzwww 2026-04-09 20/1000 2026-04-10 15:55 by 求调剂zz
[考研] 一志愿沪9，326生物学求相关专业调剂 +4 刘墨墨 2026-04-09 4/200 2026-04-10 12:07 by pengliang8036
[考研] 0702物理学学硕299求调剂 +6 祁柒连 2026-04-06 6/300 2026-04-10 11:10 by Roomoo
[考研] 314求调剂 +14 weltZeng 2026-04-09 14/700 2026-04-09 23:14 by wolf97
[考研] 复试调剂，一志愿郑州大学材料与化工289分 +31 硕星赴 2026-04-08 31/1550 2026-04-09 16:54 by Delta2012
[考研] 368化学求调剂 +13 wwwwabcde 2026-04-07 14/700 2026-04-09 14:47 by heaven_jay
[考研] 求调剂 +7 chenxrlkx 2026-04-05 9/450 2026-04-09 09:04 by wj165256
[考研] 307分材料专业求调剂 +12 Hll胡 2026-04-05 12/600 2026-04-08 16:33 by luoyongfeng
[考研] 一志愿南昌大学，085600，344分求调剂 +11 调剂上岸玘 2026-04-05 12/600 2026-04-08 16:17 by luoyongfeng
[考研] 307求调剂 +14 超级伊昂大王 2026-04-06 14/700 2026-04-08 07:03 by 无际的草原
[考研] 调剂求助（生物与医药） +6 @6952 2026-04-06 6/300 2026-04-07 23:52 by lys0704
[考研] 调剂 +4 mcbbc 2026-04-06 5/250 2026-04-07 12:33 by upczlm1989
[考研] 297分083200求助 +9 aekx 2026-04-05 9/450 2026-04-06 20:57 by flysky1234
[考研] 材料调剂 +14 壹贰贰亿 2026-04-04 14/700 2026-04-05 23:31 by 来看流星雨10
[考研] 277求调剂 +5 考研调剂lxh 2026-04-05 5/250 2026-04-05 19:03 by chy09050039
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭