24小时热门版块排行榜    

查看: 848  |  回复: 12
当前主题已经存档。
【有奖交流】积极回复本帖子,参与交流,就有机会分得作者 liyong1981 的 1 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)


[交流] 【求助/交流】westernbloy问题 已有6人参与

如题

我马上要做两个蛋白一个大概90K,一个大概38K,我想一般SDS胶跑,请问高手,分离胶和积层胶浓度大概用多大的?还有,我转印 的时候能在一张膜上么?多长时间呢?谢谢
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)


谢谢大家,再有我想知道,有没有做过抗体库的朋友,是这样的,我现在设计了个模板,想在TG1和HB2151中表达,如果能表达我的SCFV,我就可以下一步设计随机引物了,我的问题是,我不用M13噬菌体超感染,只用IPTG诱导,SDS裂解,westernblot能看出来么?
7楼2010-04-15 13:18:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

antibody01

金虫 (著名写手)

★ ★
liyong1981(金币+1):谢谢参与
scelab(金币+1):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-04-15 11:53
我通常用4-20的梯度胶做分离胶,转印可以在一张膜上的。
生活就像强奸,无法反抗就要学会享受; 工作就像轮奸,你不行就要别人上; 社会就像自慰,一切都要靠自己的双手解决。
2楼2010-04-15 09:39:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主

★ ★
liyong1981(金币+1):谢谢参与
scelab(金币+1):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-04-15 11:53
浓度影响不大,能分开的,

一张膜也没问题,选择相同的一抗来源就行
3楼2010-04-15 10:00:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)


分离胶不是有个线性范围么?大概哟哦那个多大呢?我上次用的6%的胶,SDS跑的MARKER都很不好
4楼2010-04-15 10:45:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 科研孤儿太难了 +16 我4大白菜 2026-08-20 17/850 2026-08-21 19:07 by sakuraai
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +15 医学老男孩 2026-08-20 19/950 2026-08-21 18:54 by 医学老男孩
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 14/700 2026-08-21 16:51 by applepetty
[基金申请] 人气不行了 +7 fansofjerry 2026-08-21 7/350 2026-08-21 14:13 by Vivilian
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +23 yaoyewhu2008 2026-08-20 25/1250 2026-08-21 12:19 by Poppy1104
[基金申请] 什么时候开奖? +7 CrisMessi 2026-08-18 7/350 2026-08-21 12:15 by weiyin
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +15 kkkl_v 2026-08-19 16/800 2026-08-21 11:22 by 365372687
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 13/650 2026-08-21 08:30 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见