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w.king124

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[交流] 【求助/交流】做过原核表达的高手请进！！！已有10人参与

轮状病毒VP7基因连到pET32a上，在BL21中诱导表达，没有出结果，怎么办呀，急死了

我该换载体还是菌株呢？大家有做过的推荐一下啊，谢谢了

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1楼 2010-04-13 08:51:45

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引用回帖:

Originally posted by 月月大可 at 2010-04-13 12:43:00:
测序结果出来后一定要比对整个阅读框，从T7启动子区开始到终止密码子地方。
对该基因进行稀有密码子分析，看是否存在大量串联的稀有密码子出现，大量出现也会影响表达。如果是建议更换Rosetta系列菌株。
是否为 ...

其实我最先做的就是在Rosetta菌株中诱导表达，SDS-PAGE电泳检测（现在也只有着一种方法可行），没有结果，之后我才在BL21中诱导的。
是不是表达的蛋白有点大呢？我的蛋白是326aa