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zyj22098

铜虫 (小有名气)

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[交流] 【求助】蛋白质释放含量测试已有3人参与

凝胶载BSA，凝胶会降解为水溶性高分子，释放BSA，想用考马斯亮蓝法测释放浓度。请问载了蛋白的凝胶放入降解液中，降解过程中高分子的溶解使体系浓度增加是否会影响考马斯亮蓝于蛋白质结合显色？能用此法测释放浓度吗？

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1楼 2010-04-12 16:23:10

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

weiyanbme

木虫 (正式写手)

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yusen_1982(金币+1):欢迎讨论！ 2010-04-13 10:23

引用回帖:

Originally posted by zyj22098 at 2010-04-12 16:23:10:
凝胶载BSA，凝胶会降解为水溶性高分子，释放BSA，想用考马斯亮蓝法测释放浓度。请问载了蛋白的凝胶放入降解液中，降解过程中高分子的溶解使体系浓度增加是否会影响考马斯亮蓝于蛋白质结合显色？能用此法测释放浓 ...

braford法测蛋白浓度
原理：考马斯亮兰G-250染料，在酸性溶液中与蛋白质结合，使染料的最大吸收峰的位置（lmax），由465nm变为595nm，溶液的颜色也由棕黑色变为兰色。经研究认为，染料主要是与蛋白质中的碱性氨基酸（特别是精氨酸）和芳香族氨基酸残基相结合。

凝胶降解后有类似的是染料变色的蛋白吗，建议先做未载蛋白的载体降解后的实验，看结果后再做，blessing