【求助/交流】怎么算PCR的引物退火温度啊？ - 分子生物 - 综合其他

就这么熬着，什么时候是个头……

11楼2010-04-12 19:51:12

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dyszz

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不错，，正在研究中~~

12楼2010-04-12 20:00:47

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wz-louis

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将你的左引物和右引物的Tm值取个平均值，一般来讲，引物的退火温度在上下不差5都可以P出产物来，这个可以不必担心！

笑面人生

13楼2010-04-13 07:01:53

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wz-louis

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将左右两个引物的Tm值取个平均值，大概也就是55度左右，一般来讲，温度在上下不差5度都可以P出来！

笑面人生

14楼2010-04-13 07:04:34

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zhang6871

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1,引物应该是成对的，
2，退火温度是可以算出来的，用Oligo软件很轻松。

过于功利，浮躁，布满灰尘的心都是创新的杀手!多记，心静，多动手，贴近大自然!

15楼2010-04-13 09:53:42

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shuwenying

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我一般是按照低的那个温度开始试，例如楼主给的这个，我就会从51度开始试

16楼2010-04-13 12:25:31

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大姗

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退火温度一般是Tm值减去5~10°，还得多试几次

17楼2010-04-13 13:20:46

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gundamba

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放到PRIMAER5.0里面算一下，它会给出一个最佳的退火温度，然后你再适当的降低一点那个温度就可以了，你的引物有些短，记得加上酶切位点

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18楼2010-04-13 16:23:55

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邓娟

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引用回帖:

Originally posted by zhang6871 at 2010-04-13 09:53:42:
1,引物应该是成对的，
2，退火温度是可以算出来的，用Oligo软件很轻松。

引物是一对，还有一个BAF
谢谢

就这么熬着，什么时候是个头……

19楼2010-04-13 20:26:51

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邓娟

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引用回帖:

Originally posted by wz-louis at 2010-04-13 07:01:53:
将你的左引物和右引物的Tm值取个平均值，一般来讲，引物的退火温度在上下不差5都可以P出产物来，这个可以不必担心！

好的，谢谢