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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】怎么算PCR的引物退火温度啊？
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邓娟

金虫 (小有名气)

Diary
引用回帖:
Originally posted by ydniu at 2010-04-12 17:36:08:
引物好象不是一对呀？

额……确实还有一个BAF，但是我没有写出来，应该差不多的吧，算的方法是一样吧？
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就这么熬着，什么时候是个头……
11楼2010-04-12 19:51:12
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dyszz

铜虫 (小有名气)
不错，，正在研究中~~
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12楼2010-04-12 20:00:47
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wz-louis

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+1):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-04-13 13:27
将你的左引物和右引物的Tm值取个平均值，一般来讲，引物的退火温度在上下不差5都可以P出产物来，这个可以不必担心！
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笑面人生
13楼2010-04-13 07:01:53
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wz-louis

银虫 (小有名气)
将左右两个引物的Tm值取个平均值，大概也就是55度左右，一般来讲，温度在上下不差5度都可以P出来！
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笑面人生
14楼2010-04-13 07:04:34
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zhang6871

银虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+1):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-04-13 13:27
1,引物应该是成对的，
2，退火温度是可以算出来的，用Oligo软件很轻松。
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过于功利，浮躁，布满灰尘的心都是创新的杀手!多记，心静，多动手，贴近大自然!
15楼2010-04-13 09:53:42
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shuwenying

铁虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+1):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-04-13 13:27
我一般是按照低的那个温度开始试，例如楼主给的这个，我就会从51度开始试
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16楼2010-04-13 12:25:31
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大姗

铜虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+1):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-04-13 13:27
退火温度一般是Tm值减去5~10°，还得多试几次
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17楼2010-04-13 13:20:46
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gundamba

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
放到PRIMAER5.0里面算一下，它会给出一个最佳的退火温度，然后你再适当的降低一点那个温度就可以了，你的引物有些短，记得加上酶切位点
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18楼2010-04-13 16:23:55
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邓娟

金虫 (小有名气)

Diary
引用回帖:
Originally posted by zhang6871 at 2010-04-13 09:53:42:
1,引物应该是成对的，
2，退火温度是可以算出来的，用Oligo软件很轻松。

引物是一对，还有一个BAF
谢谢
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就这么熬着，什么时候是个头……
19楼2010-04-13 20:26:51
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邓娟

金虫 (小有名气)

Diary
引用回帖:
Originally posted by wz-louis at 2010-04-13 07:01:53:
将你的左引物和右引物的Tm值取个平均值，一般来讲，引物的退火温度在上下不差5都可以P出产物来，这个可以不必担心！

好的，谢谢
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就这么熬着，什么时候是个头……
20楼2010-04-13 20:28:39
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