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【求助/交流】有关抑菌圈试验中菌种的浓度问题！已有22人参与
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请教大家：我现在做抑菌圈试验，看有的文献上说，菌种活化后，要配菌悬液啥 的，比如用生理盐水配成含菌数105 -106/ml的菌悬液怎么配呢？是不是通过浊度 和含菌量有一定的换算关系？有没有简单易行的方法呢？急啊，谢谢大家了。  |
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yushanyou12
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frank345(金币+1):谢谢参与
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小木虫: 金币+2, 帖子真精彩 2014-06-05 09:56:27
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有成熟的方法，举例说明，如下 我以前做阳性对照试验，使用的是金葡菌和大肠杆菌。就是先把金葡菌和大肠杆菌的菌种都先用营养肉汤培养一天，这里里面的活性菌的量会达到一个动态平衡，就是不断的生长和死亡。之后吸取1ML该培养液到100ml生理盐水中，制成很浓的菌悬液。再然后就对该浓菌液进行10倍递增稀释，一般稀释到10-7到-8次就是每毫升100cfu左右的菌悬液了。 至于菌液的稀释方法应该是要自己掌握的，那就是手感还与你的培养基培养温度，菌种有关。建议进行几次菌液稀释的平行实验并增强熟练度。掌握一个大概需要稀释到几次方。然后以后在真正做实验的时候，一般是实验和平板计数同时进行的，实验结果出来了，平板计数的结果也就出来了。在根据平板计数的结果来计算抑菌的效果。 另外这个方法还有一个好处就是，配置的弄菌悬液是可以在4度左右的温度下保存一周的，每次使用时每次稀释并计数。不用每次都去培养，但是越到后面效果就越差，也就是活性菌的量越小，稀释的倍数也就要相应减小。低浓度的菌液是不能保存的，只能当天使用。 呵呵，我这个方法是在药厂做阳性对照试验时用的，也用于药物的抑菌验证，也就是限度实验方法验证。你自己做实验用的话，因为菌种的不同及其他的因素，你是要自己先做验证实验的，菌种的培养基也根据你的菌种要求选择，当然验证实验无论什么时候也都是必须的。该方法颇为有效，可做参考 。 |
3楼2010-04-08 16:14:38
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