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【求助/交流】稳筛C2C12细胞为什么EGFP越来越暗？ 已有2人参与
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| 发现筛了一个月的细胞绿色荧光很暗很暗，荧光显微镜下肉眼都看不到，只能靠摄像器材拍到，哪位高手能解释一下？ |
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4楼2010-04-08 16:44:47
2楼2010-04-08 10:48:56
3楼2010-04-08 12:27:13
| 其实我已经得到持续表达GF的细胞克隆，但是扩增后EGFP表达很暗。恩，其实想想，荧光变暗最直接的原因应该是GFP蛋白表达降低，如果我的质粒没有整合到基因组，那应该很好解释，就是说由于细胞不停的分裂，拥有质粒的细胞数相对逐渐减少，相当于是一个稀释效应，再加上不知道大家常说的生长优势（其实我一直不太懂为什么有了外援质粒细胞就会处于生长劣势），表达GFP的细胞会越来越少，这样就会造成GFP越来越暗的效果。可是，我的质粒应当是稳定整合到了基因组中，而且我现在手里的又是稳定表达GFP的细胞克隆扩增得到的大量细胞，镜下看就是满皿都是发暗荧光的细胞，为什么可以随基因组一起复制的GFP会这么暗呢？ |
5楼2010-04-08 18:56:50