| 查看: 654 | 回复: 4 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
[交流]
【求助/交流】稳筛C2C12细胞为什么EGFP越来越暗？ 已有2人参与
|
|||
| 发现筛了一个月的细胞绿色荧光很暗很暗，荧光显微镜下肉眼都看不到，只能靠摄像器材拍到，哪位高手能解释一下？ |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有86人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
2楼2010-04-08 10:48:56
3楼2010-04-08 12:27:13
4楼2010-04-08 16:44:47
| 其实我已经得到持续表达GF的细胞克隆，但是扩增后EGFP表达很暗。恩，其实想想，荧光变暗最直接的原因应该是GFP蛋白表达降低，如果我的质粒没有整合到基因组，那应该很好解释，就是说由于细胞不停的分裂，拥有质粒的细胞数相对逐渐减少，相当于是一个稀释效应，再加上不知道大家常说的生长优势（其实我一直不太懂为什么有了外援质粒细胞就会处于生长劣势），表达GFP的细胞会越来越少，这样就会造成GFP越来越暗的效果。可是，我的质粒应当是稳定整合到了基因组中，而且我现在手里的又是稳定表达GFP的细胞克隆扩增得到的大量细胞，镜下看就是满皿都是发暗荧光的细胞，为什么可以随基因组一起复制的GFP会这么暗呢？ |
5楼2010-04-08 18:56:50
