| 查看: 664 | 回复: 4 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
[交流]
【求助/交流】稳筛C2C12细胞为什么EGFP越来越暗？ 已有2人参与
|
|||
| 发现筛了一个月的细胞绿色荧光很暗很暗，荧光显微镜下肉眼都看不到，只能靠摄像器材拍到，哪位高手能解释一下？ |
回复此楼» 猜你喜欢
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有19人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有131人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
-
ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析
已经有0人回复
-
AM630（CAS 164178-33-0）：CB2 选择性配体的实验使用与供应要点
已经有0人回复
-
ADC标杆分子T-DM1全解析：从结构设计到实验室应用的技术要点
已经有0人回复
-
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？
已经有0人回复
-
His标签蛋白纯化怎么才能快？
已经有0人回复
2楼2010-04-08 10:48:56
3楼2010-04-08 12:27:13
4楼2010-04-08 16:44:47
| 其实我已经得到持续表达GF的细胞克隆，但是扩增后EGFP表达很暗。恩，其实想想，荧光变暗最直接的原因应该是GFP蛋白表达降低，如果我的质粒没有整合到基因组，那应该很好解释，就是说由于细胞不停的分裂，拥有质粒的细胞数相对逐渐减少，相当于是一个稀释效应，再加上不知道大家常说的生长优势（其实我一直不太懂为什么有了外援质粒细胞就会处于生长劣势），表达GFP的细胞会越来越少，这样就会造成GFP越来越暗的效果。可是，我的质粒应当是稳定整合到了基因组中，而且我现在手里的又是稳定表达GFP的细胞克隆扩增得到的大量细胞，镜下看就是满皿都是发暗荧光的细胞，为什么可以随基因组一起复制的GFP会这么暗呢？ |
5楼2010-04-08 18:56:50