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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】为什么跑出的RNA电泳图只有一条带，而且很亮？
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阳光金鱼唐

金虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
建议用试剂盒提，北京原平皓的试剂盒，瞎提都提的出来，每次都是3条带，trizo法提30次只有一次比较好
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不知道什么是生活了，也不知道生活是什么了
21楼2010-04-08 10:21:47
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zdfang83

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我昨天刚刚提过，我的是很明显的三条带，一条大于2KB，另两条没有注意是多大
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22楼2010-04-08 11:07:58
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holyala

木虫 (著名写手)

砖家
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
LZ提了问就闪了，剩下两位高人在PK

~~哎，没图没真相真是害死人啊。

给张我们检测total RNA的电泳图，虽然照的不是很清楚，但是三条带大概能看到。
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23楼2010-04-08 11:15:02
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谁知道

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-04-06 23:29:30:
无图无真相~~~
跟marker比大概是哪个位置？

不好意思，这边电脑出了点故障，图片上不去，我今天又提了一次，简单描述一下：今天的23S 和16S 条带特别弱，几乎看不到，而5S特别亮，有点像PCR产物跑胶的引物二聚体。RNA浓度为411ng每微升，260/280为1.97.帮忙分析一下啊,谢谢！
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每个人一辈子从来都是一个人
24楼2010-04-08 20:16:11
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谁知道

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by holyala at 2010-04-08 11:15:02:
LZ提了问就闪了，剩下两位高人在PK

~~哎，没图没真相真是害死人啊。

给张我们检测total RNA的电泳图，虽然照的不是很清楚，但是三条带大概能看到。

[img]http://pic.muchong.com/201004/08/457557_2010408 ...

请问这是什么材料的RNA？
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每个人一辈子从来都是一个人
25楼2010-04-08 20:17:16
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谁知道

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 谁知道 at 2010-04-08 20:17:16:

请问这是什么材料的RNA？

是细菌吗
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每个人一辈子从来都是一个人
26楼2010-04-08 20:17:53
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holyala

木虫 (著名写手)

砖家
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 谁知道 at 2010-04-08 20:17:53:

是细菌吗

没错，细菌。
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27楼2010-04-09 09:32:18
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holyala

木虫 (著名写手)

砖家
★ ★ ★
scelab(金币+3):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-04-09 12:45
引用回帖:
Originally posted by 谁知道 at 2010-04-08 20:16:11:

不好意思，这边电脑出了点故障，图片上不去，我今天又提了一次，简单描述一下：今天的23S 和16S 条带特别弱，几乎看不到，而5S特别亮，有点像PCR产物跑胶的引物二聚体。RNA浓度为411ng每微升，260/280为1.97.帮 ...

另外，LZ如果是用TRIzol提取细菌的total RNA，然后直接乙醇沉淀，很有可能出现上述情况，5S区特别亮，这个我也遇到过很多次。如果用5M LiCl代替无水乙醇，可以有所改善，但不能完全解决问题。最好的方法是用试剂盒，例如invitrogen的RNeasy kit，上海生工也有一些RNA提取试剂盒，效果不错。
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28楼2010-04-09 09:36:21
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谁知道

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by holyala at 2010-04-09 09:36:21:



另外，LZ如果是用TRIzol提取细菌的total RNA，然后直接乙醇沉淀，很有可能出现上述情况，5S区特别亮，这个我也遇到过很多次。如果用5M LiCl代替无水乙醇，可以有所改善，但不能完全解决问题。最好的方法是用 ...

我是用异丙醇沉淀RNA，谢谢建议啊！
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每个人一辈子从来都是一个人
29楼2010-04-09 11:09:22
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谁知道

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 谁知道 at 2010-04-09 11:09:22:

我是用异丙醇沉淀RNA，谢谢建议啊！

还有个问题想问一下：在跑胶用的缓冲液必需用DEPC水配制吗？我测得260/280还不错，是不在跑胶过程中RNA降解了啊？
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每个人一辈子从来都是一个人
30楼2010-04-09 13:28:46
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