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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】为什么跑出的RNA电泳图只有一条带，而且很亮？
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谁知道

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】为什么跑出的RNA电泳图只有一条带，而且很亮？ 已有9人参与

我用trizo法提取的细菌RNA，分光光度计检测其浓度为100ng/微升，260/280为1.9 ， 260/230为2.25l ，可为什么跑出的RNA电泳图只有一条带，而且很亮呢？
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每个人一辈子从来都是一个人
1楼 2010-04-06 22:09:25
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holyala

木虫 (著名写手)

砖家
★ ★ ★
scelab(金币+3):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-04-09 12:45
引用回帖:
Originally posted by 谁知道 at 2010-04-08 20:16:11:

不好意思，这边电脑出了点故障，图片上不去，我今天又提了一次，简单描述一下：今天的23S 和16S 条带特别弱，几乎看不到，而5S特别亮，有点像PCR产物跑胶的引物二聚体。RNA浓度为411ng每微升，260/280为1.97.帮 ...

另外，LZ如果是用TRIzol提取细菌的total RNA，然后直接乙醇沉淀，很有可能出现上述情况，5S区特别亮，这个我也遇到过很多次。如果用5M LiCl代替无水乙醇，可以有所改善，但不能完全解决问题。最好的方法是用试剂盒，例如invitrogen的RNeasy kit，上海生工也有一些RNA提取试剂盒，效果不错。
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28楼2010-04-09 09:36:21
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DNAhelix

银虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1): 2010-04-07 08:12
当时提取真核细胞RNA时，有三条带，28s/18s约为2：1.
原核也应该有三条带吧。

是不是没提取好？那一条亮带大概在什么位置？如果在加样孔旁会不会是蛋白污染？
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智慧活法：不生气，不计较！
2楼2010-04-06 22:42:26
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
无图无真相~~~
跟marker比大概是哪个位置？
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3楼2010-04-06 23:29:30
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wangqk198738

金虫 (正式写手)

图片呢？

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+2): 2010-04-07 08:13
晕，没有图片大家怎么帮你分析。把图片传上来吧。我做的一般是两条带，因为mRNA和另外两个RNA的碱基数相差很大，所以会分成两条带，要是跑胶的时间长，胶制作的密一点，应该会跑出三条带。你下次跑的时间长点。同时也跟提取方法有关，要是你的方法只是提取mRNA 那就只能跑出一条带了。对伐！
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4楼2010-04-06 23:54:27
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