24小时热门版块排行榜    

查看: 6877  |  回复: 29
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

谁知道

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】为什么跑出的RNA电泳图只有一条带,而且很亮?已有9人参与

我用trizo法提取的细菌RNA,分光光度计检测其浓度为100ng/微升,260/280为1.9 , 260/230为2.25l ,可为什么跑出的RNA电泳图只有一条带,而且很亮呢?
回复此楼
每个人一辈子从来都是一个人
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

holyala

木虫 (著名写手)

砖家

★ ★ ★
scelab(金币+3):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-04-09 12:45
引用回帖:
Originally posted by 谁知道 at 2010-04-08 20:16:11:

不好意思,这边电脑出了点故障,图片上不去,我今天又提了一次,简单描述一下:今天的23S 和16S 条带特别弱,几乎看不到,而5S特别亮,有点像PCR产物跑胶的引物二聚体。RNA浓度为411ng每微升,260/280为1.97.帮 ...

另外,LZ如果是用TRIzol提取细菌的total RNA,然后直接乙醇沉淀,很有可能出现上述情况,5S区特别亮,这个我也遇到过很多次。如果用5M LiCl代替无水乙醇,可以有所改善,但不能完全解决问题。最好的方法是用试剂盒,例如invitrogen的RNeasy kit,上海生工也有一些RNA提取试剂盒,效果不错。
28楼2010-04-09 09:36:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 30 个回答

DNAhelix

银虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1): 2010-04-07 08:12
当时提取真核细胞RNA时,有三条带,28s/18s约为2:1.
原核也应该有三条带吧。

是不是没提取好?那一条亮带大概在什么位置?如果在加样孔旁会不会是蛋白污染?
智慧活法:不生气,不计较!
2楼2010-04-06 22:42:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
无图无真相~~~
跟marker比大概是哪个位置?
3楼2010-04-06 23:29:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangqk198738

金虫 (正式写手)

图片呢?

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+2): 2010-04-07 08:13
晕,没有图片大家怎么帮你分析。把图片传上来吧。我做的一般是两条带,因为mRNA和另外两个RNA的碱基数相差很大,所以会分成两条带,要是跑胶的时间长,胶制作的密一点,应该会跑出三条带。你下次跑的时间长点。同时也跟提取方法有关,要是你的方法只是提取mRNA 那就只能跑出一条带了。对伐!
4楼2010-04-06 23:54:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复(可上传附件)
信息提示
请填处理意见