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谁知道

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】为什么跑出的RNA电泳图只有一条带,而且很亮?已有9人参与

我用trizo法提取的细菌RNA,分光光度计检测其浓度为100ng/微升,260/280为1.9 , 260/230为2.25l ,可为什么跑出的RNA电泳图只有一条带,而且很亮呢?
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DNAhelix

银虫 (著名写手)

★ ★
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1949stone(金币+1): 2010-04-07 08:12
当时提取真核细胞RNA时,有三条带,28s/18s约为2:1.
原核也应该有三条带吧。

是不是没提取好?那一条亮带大概在什么位置?如果在加样孔旁会不会是蛋白污染?
智慧活法:不生气,不计较!
2楼2010-04-06 22:42:26
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


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无图无真相~~~
跟marker比大概是哪个位置?
3楼2010-04-06 23:29:30
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wangqk198738

金虫 (正式写手)

图片呢?

★ ★ ★
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1949stone(金币+2): 2010-04-07 08:13
晕,没有图片大家怎么帮你分析。把图片传上来吧。我做的一般是两条带,因为mRNA和另外两个RNA的碱基数相差很大,所以会分成两条带,要是跑胶的时间长,胶制作的密一点,应该会跑出三条带。你下次跑的时间长点。同时也跟提取方法有关,要是你的方法只是提取mRNA 那就只能跑出一条带了。对伐!
4楼2010-04-06 23:54:27
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hejp03

至尊木虫 (著名写手)


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楼主上图啊!很想看看!
5楼2010-04-07 03:47:12
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DNAhelix

银虫 (著名写手)


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引用回帖:
Originally posted by wangqk198738 at 2010-04-06 23:54:27:
晕,没有图片大家怎么帮你分析。把图片传上来吧。我做的一般是两条带,因为mRNA和另外两个RNA的碱基数相差很大,所以会分成两条带,要是跑胶的时间长,胶制作的密一点,应该会跑出三条带。你下次跑的时间长点。同 ...

提取mRNA是一条带,是什么RNA的条带?
智慧活法:不生气,不计较!
6楼2010-04-07 10:05:59
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wangqk198738

金虫 (正式写手)

新手?


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引用回帖:
Originally posted by DNAhelix at 2010-04-07 10:05:59:


提取mRNA是一条带,是什么RNA的条带?

你提取的任何mRNA在电泳检测的时候不出意外都会是一条带,你可不要想着,电泳不是都能分清一个碱基对区别的RNA吗?这就是检测的特点,我们不需要太详细,只要有就行。但是要是说必对,那就得用高分辨率的电泳检测了,可制胶的密度有关哦。你的胶越浓分辨率越高。因为mRNA的碱基数相对较多,所以和另外的r,tRNA形成了鲜明的对比。分两条带是自然的。不信你搜论文看看他们给出的条带,但是多数他们都一带而过,不提。这就得看你论文的多少了。多的话,或许你能碰到这么一张两条带的图片。祝好!不明白就说详细点再问,你可以重新编辑你的帖子,把图片发上来。
7楼2010-04-07 10:19:22
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silicare

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毫无疑问降解了,难道你还指望TRIZOL能提出DNA来吗?
8楼2010-04-07 10:21:36
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主

引用回帖:
Originally posted by wangqk198738 at 2010-04-07 10:19:22:

你提取的任何mRNA在电泳检测的时候不出意外都会是一条带,

竖着的吧
9楼2010-04-07 10:24:08
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DNAhelix

银虫 (著名写手)


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引用回帖:
Originally posted by wangqk198738 at 2010-04-07 10:19:22:

你提取的任何mRNA在电泳检测的时候不出意外都会是一条带,你可不要想着,电泳不是都能分清一个碱基对区别的RNA吗?这就是检测的特点,我们不需要太详细,只要有就行。但是要是说必对,那就得用高分辨率的电泳检测 ...

真的不明白。
提取RNA时,因为rRNA表达量大,而rRNA又分为28S, 18S, 5.8S及5S,跑胶时一般看到三条带。
如果单纯提取mRNA,那么应该是smear带才对吧!
请赐教!

[ Last edited by DNAhelix on 2010-4-7 at 10:26 ]
智慧活法:不生气,不计较!
10楼2010-04-07 10:24:46
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