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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】为什么跑出的RNA电泳图只有一条带，而且很亮？
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谁知道

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】为什么跑出的RNA电泳图只有一条带，而且很亮？ 已有9人参与

我用trizo法提取的细菌RNA，分光光度计检测其浓度为100ng/微升，260/280为1.9 ， 260/230为2.25l ，可为什么跑出的RNA电泳图只有一条带，而且很亮呢？
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每个人一辈子从来都是一个人
1楼 2010-04-06 22:09:25
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DNAhelix

银虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1): 2010-04-07 08:12
当时提取真核细胞RNA时，有三条带，28s/18s约为2：1.
原核也应该有三条带吧。

是不是没提取好？那一条亮带大概在什么位置？如果在加样孔旁会不会是蛋白污染？
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智慧活法：不生气，不计较！
2楼2010-04-06 22:42:26
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
无图无真相~~~
跟marker比大概是哪个位置？
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3楼2010-04-06 23:29:30
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wangqk198738

金虫 (正式写手)

图片呢？

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+2): 2010-04-07 08:13
晕，没有图片大家怎么帮你分析。把图片传上来吧。我做的一般是两条带，因为mRNA和另外两个RNA的碱基数相差很大，所以会分成两条带，要是跑胶的时间长，胶制作的密一点，应该会跑出三条带。你下次跑的时间长点。同时也跟提取方法有关，要是你的方法只是提取mRNA 那就只能跑出一条带了。对伐！
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4楼2010-04-06 23:54:27
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hejp03

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
楼主上图啊！很想看看！
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5楼2010-04-07 03:47:12
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DNAhelix

银虫 (著名写手)
★
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引用回帖:
Originally posted by wangqk198738 at 2010-04-06 23:54:27:
晕，没有图片大家怎么帮你分析。把图片传上来吧。我做的一般是两条带，因为mRNA和另外两个RNA的碱基数相差很大，所以会分成两条带，要是跑胶的时间长，胶制作的密一点，应该会跑出三条带。你下次跑的时间长点。同 ...

提取mRNA是一条带，是什么RNA的条带？
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智慧活法：不生气，不计较！
6楼2010-04-07 10:05:59
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wangqk198738

金虫 (正式写手)

新手?

★
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引用回帖:
Originally posted by DNAhelix at 2010-04-07 10:05:59:


提取mRNA是一条带，是什么RNA的条带？

你提取的任何mRNA在电泳检测的时候不出意外都会是一条带，你可不要想着，电泳不是都能分清一个碱基对区别的RNA吗?这就是检测的特点，我们不需要太详细，只要有就行。但是要是说必对，那就得用高分辨率的电泳检测了，可制胶的密度有关哦。你的胶越浓分辨率越高。因为mRNA的碱基数相对较多，所以和另外的r,tRNA形成了鲜明的对比。分两条带是自然的。不信你搜论文看看他们给出的条带，但是多数他们都一带而过，不提。这就得看你论文的多少了。多的话，或许你能碰到这么一张两条带的图片。祝好！不明白就说详细点再问，你可以重新编辑你的帖子，把图片发上来。
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7楼2010-04-07 10:19:22
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
毫无疑问降解了，难道你还指望TRIZOL能提出DNA来吗？
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8楼2010-04-07 10:21:36
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
引用回帖:
Originally posted by wangqk198738 at 2010-04-07 10:19:22:

你提取的任何mRNA在电泳检测的时候不出意外都会是一条带，

竖着的吧
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9楼2010-04-07 10:24:08
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DNAhelix

银虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by wangqk198738 at 2010-04-07 10:19:22:

你提取的任何mRNA在电泳检测的时候不出意外都会是一条带，你可不要想着，电泳不是都能分清一个碱基对区别的RNA吗?这就是检测的特点，我们不需要太详细，只要有就行。但是要是说必对，那就得用高分辨率的电泳检测 ...

真的不明白。
提取RNA时，因为rRNA表达量大，而rRNA又分为28S， 18S， 5.8S及5S，跑胶时一般看到三条带。
如果单纯提取mRNA,那么应该是smear带才对吧！
请赐教！

[ Last edited by DNAhelix on 2010-4-7 at 10:26 ]
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智慧活法：不生气，不计较！
10楼2010-04-07 10:24:46
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