| 查看: 189 | 回复: 0 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
[交流]
【求助/交流】引物质谱结果好，怎么还有30-40%引物发生碱基缺失
|
|||
|
最近在用一种新方法做pcr拼接基因，能够串联成为5个以上拷贝的基因，但是有一个问题相当恼火，那就是引物 第一次做的引物是在捷瑞，单菌落测序发现有30-40%的下游引物发生了某个“A”的缺失（上游引物无任何突变发生），导致整条DNA 链报废，然后在生工重合上下游引物（45bp），用ultrapage纯化，质谱图只有一条峰，但是做出来的结果还是像上次一样，单菌落测序发现有30-40%的下游引物发生了这同一个“A”的缺失，我靠，请帮忙分析是什么原因？ 肯定不是PCR的问题，也不是割胶经紫外线照射突变的，难道是质粒复制过程中发生的？  |
回复此楼» 猜你喜欢
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有19人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有202人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
-
ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析
已经有0人回复
-
AM630（CAS 164178-33-0）：CB2 选择性配体的实验使用与供应要点
已经有0人回复
-
ADC标杆分子T-DM1全解析：从结构设计到实验室应用的技术要点
已经有0人回复
-
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？
已经有0人回复
-
His标签蛋白纯化怎么才能快？
已经有0人回复