24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 607  |  回复: 6
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

wbfree

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】测序结果分析

连接转化之后提质粒DNA,然后酶切效果都挺好的,测序结果都是有一段序列和载体序列是一致的,另外的一段与载体、目标片段均不一致。(均测一个反应)请分析一下这是什么原因造成的?是没有连上呢,还是测序过程中的问题?谢谢
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wbfree

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-03-31 15:10:04:
就是说你连上的不是目标片段,你连进去的片段应该是PCR扩增的吧,那么你现在的测序结果,有你的PCR引物吗?

我就是用回收的PCR扩增的片段连上的,测序结果没有PCR引物,
4楼2010-04-01 09:00:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

yujiaping1

木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+1): 2010-03-31 20:45
就是说你连上的不是目标片段,你连进去的片段应该是PCR扩增的吧,那么你现在的测序结果,有你的PCR引物吗?
2楼2010-03-31 15:10:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dfl204

铁杆木虫 (著名写手)


amisking(金币+1): 2010-03-31 20:45
可以用载体上的引物加上你目的序列的引物扩增以后再次确认后送出去测序。
3楼2010-03-31 20:21:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
是完全找不到引物,还是引物序列存在不同的碱基,你要用你的引物去BLAST,而不是直接搜索
如果就是找不到引物,那说明你扩增出来的片段看起来和目标片段的大小一致,但实际上就不是目标片段,当然也有可能是克隆的问题,可以再做一次,重新测序一下看看和前一次的结果是不是一样,如果还是这样的结果,只能重新设计引物
5楼2010-04-01 11:02:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +11 月@163.com 2026-04-07 13/650 2026-04-11 22:55 by BruceLiu320
[考研] 280求调剂 +12 wzzz王 2026-04-09 12/600 2026-04-11 22:36 by dongdian1
[考研] 求助调剂,跨调 +10 X十甫寸Y 2026-04-11 10/500 2026-04-11 21:26 by 蓝云思雨
[考研] 求调剂 +6 小聂爱学习 2026-04-11 9/450 2026-04-11 21:20 by 蓝云思雨
[考研] 296求调剂 +8 汪!?! 2026-04-09 8/400 2026-04-11 21:02 by 逆水乘风
[考研] 301求调剂 +6 XYPLR 2026-04-05 9/450 2026-04-11 20:37 by Delta2012
[考研] 086003调剂求助 +21 苏弋万 2026-04-09 22/1100 2026-04-11 20:25 by dongdian1
[考研] 266求调剂,一志愿哈工程电子信息,本科获多项国奖和省奖 +8 lumine1 2026-04-06 8/400 2026-04-11 18:35 by 逆水乘风
[考研] 11408。358求调剂 +3 TMYzds 2026-04-07 3/150 2026-04-11 17:10 by 氮气气气
[考研] 一志愿新疆大学085401,314分 +3 咔咔咔咔9 2026-04-05 3/150 2026-04-11 14:31 by 猪会飞
[考研] 085410-273求调剂 +6 X1999 2026-04-10 6/300 2026-04-11 10:32 by Delta2012
[考研] 还有化工二轮调剂的学校吗 5+14 化工人999 2026-04-09 48/2400 2026-04-11 10:27 by 89436494
[考研] 314求调剂 +18 xhhdjdjsjks 2026-04-09 19/950 2026-04-10 18:53 by HPUCZ
[考研] 一志愿鲁东大学071000生物学学硕初试分数276求调剂 +20 慕绝cc 2026-04-09 24/1200 2026-04-10 10:22 by xujun0624
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-04-05 11/550 2026-04-10 09:32 by 钟洲2011
[考研] 考研调剂 +13 冰冰,,, 2026-04-07 13/650 2026-04-09 17:01 by Lilly_Li
[考研] 353求调剂 +8 晴空万里air 2026-04-07 8/400 2026-04-09 00:18 by GouQ
[考研] 软件工程求调剂22软工296分求调剂,接受跨调 +4 yangchen2017 2026-04-08 5/250 2026-04-08 21:56 by 土木硕士招生
[考研] 304求调剂 +10 素年祭语 2026-04-06 17/850 2026-04-08 09:05 by 蓝云思雨
[考研] 专硕304找调剂,一线城市最好 +3 李lsl李 2026-04-05 3/150 2026-04-06 12:16 by ffffjjjj
信息提示
请填处理意见