24小时热门版块排行榜    

查看: 723  |  回复: 6
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

wbfree

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】测序结果分析

连接转化之后提质粒DNA,然后酶切效果都挺好的,测序结果都是有一段序列和载体序列是一致的,另外的一段与载体、目标片段均不一致。(均测一个反应)请分析一下这是什么原因造成的?是没有连上呢,还是测序过程中的问题?谢谢
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dfl204

铁杆木虫 (著名写手)


amisking(金币+1): 2010-03-31 20:45
可以用载体上的引物加上你目的序列的引物扩增以后再次确认后送出去测序。
3楼2010-03-31 20:21:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

yujiaping1

木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+1): 2010-03-31 20:45
就是说你连上的不是目标片段,你连进去的片段应该是PCR扩增的吧,那么你现在的测序结果,有你的PCR引物吗?
2楼2010-03-31 15:10:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wbfree

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-03-31 15:10:04:
就是说你连上的不是目标片段,你连进去的片段应该是PCR扩增的吧,那么你现在的测序结果,有你的PCR引物吗?

我就是用回收的PCR扩增的片段连上的,测序结果没有PCR引物,
4楼2010-04-01 09:00:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
是完全找不到引物,还是引物序列存在不同的碱基,你要用你的引物去BLAST,而不是直接搜索
如果就是找不到引物,那说明你扩增出来的片段看起来和目标片段的大小一致,但实际上就不是目标片段,当然也有可能是克隆的问题,可以再做一次,重新测序一下看看和前一次的结果是不是一样,如果还是这样的结果,只能重新设计引物
5楼2010-04-01 11:02:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 科研孤儿太难了 +16 我4大白菜 2026-08-20 17/850 2026-08-21 19:07 by sakuraai
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 14/700 2026-08-21 16:51 by applepetty
[基金申请] 让我中一个面上吧! +11 大萍1987 2026-08-20 13/650 2026-08-21 14:48 by 20120902066
[基金申请] 人气不行了 +7 fansofjerry 2026-08-21 7/350 2026-08-21 14:13 by Vivilian
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 什么时候开奖? +7 CrisMessi 2026-08-18 7/350 2026-08-21 12:15 by weiyin
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 13/650 2026-08-21 08:30 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +4 archvillain 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:10 by gatelove
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见