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[交流]
【求助/交流】关于质粒提取和后续双酶切实验
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最近做载体构建，有几个遇到的问题想和大家探讨一下~ 1.看了相关资料，了解到一般抽提质粒跑胶验证应该有三条带，如果我直接用这个质粒做后续的酶切，双酶切之后得到目的片段（小，约1000bp）和剩余片段（大），我想问的是剩余片段与对照质粒的三条带相比大致是怎样一个位置状况？（构建的载体是pBI121） 2.双酶切的体系问题~我是新手，查了文献，说体系一般有20，50，100ul，实际操作中这三种体系效果差别大吗？如果我想做大体系，体系中质粒，buffer，和酶的比例有没有特定要求？还有，如何确定体系中到底要不要加BSA？ 敬请高手指导~~~~~~~ |
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2楼2010-03-31 11:55:37
fungixx
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3楼2010-03-31 13:20:57