应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】引物测序结果疑问？？
51/1返回列表
查看: 1059  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 gydgs033 的 2 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

gydgs033

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】引物测序结果疑问？？

我的PCR目的产物131bp，在英俊测序（使用上下游引物同时测序），但是经常出英俊公司回复测序结果是双峰或前双峰，请问双峰和前双峰所代表的意义及产生的原因？由于我测序的目的是看是否有点突变，使用测序结果与目的产物序列比对发现，使用上游引物测序结果与目的产物序列在47bp处出现突变，目的产物为A，测序为T，但用下游引物测序在该位置无突变，请问原因？另问基因点突变是指正义链某碱基突变，而反义链也伴随其突变，还是只有正译链突变，反义链不变？？？请教高手？？？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2010-03-28 10:07:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by gydgs033 at 2010-03-29 13:48:00:

再请教一下：我的测序结果虽然说是双峰，但是他们只给出一个序列，并且我和目的序列比对之后却是100%一样，这可以说我P成功了么，还是一定要以单双峰为准啊？
另外，我提供的虽是PCR产物，但是公司是负责给纯化 ...

我觉得你的结果可信了，不用克隆了，不过你那一个突变不知道是否是真的突变，再测一个样吧
赞一下 回复此楼
5楼2010-03-29 14:17:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

段家一凡

木虫 (正式写手)
gydgs033(金币+2): 2010-03-29 13:43
双峰说明PCR产物中有两个不同的片段，前双峰可能是两种不同的PCR产物，前段不一样，后面一样。基因点突变是两条链都突变了。你可以把你的PCR产物连入载体，再测序，可能会清楚一点。
赞一下 回复此楼
2楼2010-03-28 16:24:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yzhang1986

铁杆木虫 (文坛精英)

优秀版主
gydgs033(金币+1): 2010-03-29 13:43
克隆后再测测试试
赞一下 回复此楼
3楼2010-03-28 16:56:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gydgs033

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 段家一凡 at 2010-03-28 16:24:57:
双峰说明PCR产物中有两个不同的片段，前双峰可能是两种不同的PCR产物，前段不一样，后面一样。基因点突变是两条链都突变了。你可以把你的PCR产物连入载体，再测序，可能会清楚一点。

再请教一下：我的测序结果虽然说是双峰，但是他们只给出一个序列，并且我和目的序列比对之后却是100%一样，这可以说我P成功了么，还是一定要以单双峰为准啊？
另外，我提供的虽是PCR产物，但是公司是负责给纯化的，引物也都是PAGE纯化的，这种情况还需要克隆之后再测序么？
赞一下 回复此楼
4楼2010-03-29 13:48:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 19:43 by lXgU0RvNTDC9
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 19:22 by lXgU0RvNTDC9
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 4/200 2026-08-23 15:30 by KM5EcsNQRBPn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 5/250 2026-08-23 14:33 by KM5EcsNQRBPn
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +15 羊腰板 2026-08-21 16/800 2026-08-23 10:45 by process2012
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +12 大萍1987 2026-08-20 14/700 2026-08-23 10:30 by wrm
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 10/500 2026-08-23 07:17 by OEbVnUOu01ol
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 5/250 2026-08-23 04:07 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 03:52 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 7/350 2026-08-23 03:43 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QTy3jDtz1uLt 2026-08-21 9/450 2026-08-23 03:04 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 QTy3jDtz1uLt 2026-08-21 11/550 2026-08-23 02:55 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +3 炎黄贵胄 2026-08-22 4/200 2026-08-22 20:02 by mycsru
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 科研孤儿太难了 +17 我4大白菜 2026-08-20 18/900 2026-08-21 20:57 by zhangev
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭