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huangqihong铁虫 (小有名气)
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[交流]
【求助/交流】PCR产物
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请教一下,我设计了一对Amp特异性的引物,位于Amp抗性基因的内部,引物如下: F:5’-CCGAAGAACGTTTTCCAATGATGAGC-3’ R:5’-GTCCTGCAACTTTATCCGCCTCCAT-3’ 但是用这对引物做PCR,无论用什么模板(水,不相关的DNA片段,质粒,基因组),不管它们含不含该基因,最后都能扩增出来一条带,而且和目的条带大小一样,我用过不同的退火温度(48°-62°)也都能扩增出来那条带,梯度不明显,我用的是EasyTaq(transgen)酶,不知道什么原因,请大家给点意见,谢谢! |
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silicare
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