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huangqihong铁虫 (小有名气)
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[交流]
【求助/交流】PCR产物
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请教一下，我设计了一对Amp特异性的引物，位于Amp抗性基因的内部，引物如下： F：5’-CCGAAGAACGTTTTCCAATGATGAGC-3’ R：5’-GTCCTGCAACTTTATCCGCCTCCAT-3’ 但是用这对引物做PCR，无论用什么模板（水，不相关的DNA片段，质粒，基因组），不管它们含不含该基因，最后都能扩增出来一条带，而且和目的条带大小一样，我用过不同的退火温度（48°-62°）也都能扩增出来那条带，梯度不明显，我用的是EasyTaq（transgen）酶，不知道什么原因，请大家给点意见，谢谢！ |
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4楼2010-03-26 11:48:15