应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】纯化后透析除咪唑蛋白沉淀
汕头大学海洋科学接受调剂
81/1返回列表
查看: 1064  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

1118

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】纯化后透析除咪唑蛋白沉淀 已有2人参与

现在有一蛋白，纯化后溶解在20 mM K2HPO4,500 mM咪唑中（蛋白浓度2 mg/ml左右)，蛋白在4度过夜透析到PBS，发现蛋白大部分沉淀，是什么原因呢？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2010-03-24 11:11:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1118

木虫 (小有名气)
大家积极发言哈
回复此楼
2楼2010-03-24 12:35:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1118

木虫 (小有名气)
大家积极发言哈
回复此楼
3楼2010-03-25 12:35:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

黑罕

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你可以测一下PH值
因为500mM 咪唑是偏碱的
可以考虑PH
是不是会因为PH值发生了改变
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-03-25 13:37:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1118

木虫 (小有名气)
前后PH值是一样的哈
赞一下 回复此楼
5楼2010-03-25 14:20:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

月月大可

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
你的蛋白要是不换Buffer在4度下的稳定性如何？放过夜试试。
感觉透析已经是非常温和的手法了，如果用超滤管换Buffer那将是一种很剧烈的方法，短时间浓缩到高浓度，瞬间稀释，反复折腾，这种方法倒是很有可能是蛋白沉淀。
还有可能就是相对盐浓度降低，蛋白溶解性减小。
或者下次直接使用含有咪唑的PBS洗脱目的蛋白，然后透析除掉咪唑。
试试看吧，探索一些原因。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2010-03-26 01:15:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小白3521

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 1118 at 2010-03-24 11:11:44:
现在有一蛋白，纯化后溶解在20 mM K2HPO4,500 mM咪唑中（蛋白浓度2 mg/ml左右)，蛋白在4度过夜透析到PBS，发现蛋白大部分沉淀，是什么原因呢？

问题解决了吗？我那刚透析 也出现了沉淀
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2010-04-15 20:01:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1118

木虫 (小有名气)
还没有解决哈，烦死了
赞一下 回复此楼
8楼2010-04-16 07:47:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 1118 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085500求调剂材料 +11 易11122 2026-04-09 11/550 2026-04-14 17:59 by lhj2009
[考研] 302分求调剂 +10 凡语祈愿 2026-04-08 11/550 2026-04-14 16:50 by jiangguiquan11
[考研] 恳请有学校收留 +3 柯淮然 2026-04-12 3/150 2026-04-14 16:25 by 逆水乘风
[考研] 一志愿西南大学生物学学硕344 求生物学相关调剂/生物与医药 +8 超人不会飞@ 2026-04-08 8/400 2026-04-14 16:06 by zs92450
[教师之家] 转长聘了 +7 简单化xn 2026-04-13 7/350 2026-04-14 14:50 by xindong
[考研] 考研求调剂 +12 子木呐 2026-04-12 13/650 2026-04-14 01:19 by 王珺璞
[考研] 求调剂，985材料与化工348分 +9 涵竹刘 2026-04-11 14/700 2026-04-13 22:26 by 涵竹刘
[考研] 一志愿中南大学 0855 机械 286 求调剂 +11 不会吃肉 2026-04-12 11/550 2026-04-13 21:59 by bljnqdcc
[考研] B区0809 ，数一英一，290 求调剂 +3 泠潍1111 2026-04-12 4/200 2026-04-13 20:35 by 学员JpLReM
[考研] 一志愿0807 数一英一 313 有没有二轮调剂 +12 emokidd 2026-04-08 13/650 2026-04-13 08:32 by lhj2009
[硕博家园] 新一代电子信息294求调剂 不挑学校 +7 Ytyt11 2026-04-09 8/400 2026-04-12 16:57 by ajpv风雷
[考研] 22408调剂315分 +3 zhuangyan123 2026-04-09 3/150 2026-04-12 00:25 by 蓝云思雨
[考研] 283求调剂 +22 那个噜子 2026-04-09 22/1100 2026-04-11 10:41 by 逆水乘风
[考研] 288求调剂 +15 代fish 2026-04-09 16/800 2026-04-11 10:26 by wwj2530616
[考研] 工科273调剂 +6 X1999 2026-04-09 7/350 2026-04-11 10:23 by zhq0425
[考研] 0854调剂 +8 950824he@ 2026-04-09 8/400 2026-04-11 10:11 by zhq0425
[考研] 22408 327分求调剂 +4 韵风kon 2026-04-10 4/200 2026-04-11 09:51 by 猪会飞
[考研] 吉大计算机技术331分，英语六级，求调剂 +3 峰峰021116 2026-04-09 3/150 2026-04-10 20:01 by chemisry
[考研] 本科西工大 0856 324求调剂 +10 wysyjs25 2026-04-09 11/550 2026-04-10 08:37 by 5268321
[考研] 复试调剂，一志愿郑州大学材料与化工289分 +31 硕星赴 2026-04-08 31/1550 2026-04-09 16:54 by Delta2012
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭