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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 综合其他 » 【交流】MTT实验，DMSO纯度/质量对最后的吸光度有很大影响么
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angel2536

金虫 (著名写手)

[交流] 【交流】MTT实验，DMSO纯度/质量对最后的吸光度有很大影响么

求助各位大虾，我在做MTT实验时，最后测得吸光度值感觉很低，最高也就0.5-0.6左右吧！细胞密度接近90%了，孵育时间也够长3h左右，结晶很明显的。
由于刚做MTT，没有经验值，不知上述情况是否正常！
所用的DMSO可能是公司分装的，不知对结果又没有影响啊？
http://muchong.com/bbs/post.php?action=newthread&fid=286
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1楼 2010-03-24 09:10:39
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kong0908

铜虫 (著名写手)

Jesus Walks With Me!
angel2536(金币+1): 2010-03-24 11:04
DMSO对吸光度的影响 微乎其微
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JesusWalksWithMe!
2楼2010-03-24 10:59:31
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firebolt

铁杆木虫 (著名写手)
angel2536(金币+1): 2010-03-24 13:58
DMSO没有什么影响。你用的量多大？测的哪个波长？
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3楼2010-03-24 11:22:22
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angel2536

金虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by firebolt at 2010-03-24 11:22:22:
DMSO没有什么影响。你用的量多大？测的哪个波长？

用100ul成品DMSO，测570nm的，650nm为参考波长
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4楼2010-03-24 13:58:02
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薰衣草儿

荣誉版主 (知名作家)

♡花语の恋♡

优秀版主
★
yusen_1982(金币+1):欢迎讨论！ 2010-03-25 08:10
angel2536(金币+1): 2010-03-25 14:49
溶解的时候要摇晃10分钟的，你摇了吗？见过别人用分析纯的DMSO，也可以的~
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　　　　　．*　☆．☆°　*.　☆　☆‘‘　☆。　　　　　　☆☆。　　*°　‘‘☆　☆°*‘‘°'☆
5楼2010-03-24 14:57:37
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firebolt

铁杆木虫 (著名写手)
angel2536(金币+1):谢谢 2010-03-25 14:48
引用回帖:
Originally posted by angel2536 at 2010-03-24 13:58:02:

用100ul成品DMSO，测570nm的，650nm为参考波长

我们是每孔180ul培基+20ul MTT，培养4小时。然后吸净培基换成150ul DMSO，再摇15分钟，测570nm吸光度，空孔加纯DMSO对照，细胞对照组读数一般在1.0左右
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6楼2010-03-24 19:57:13
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biology-jlu

木虫之王 (文坛精英)
angel2536(金币+1): 2010-03-25 14:53
0.5-0.6也可以用了吧？
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大家好！我的研究方向为靶向纳米给药系统，欢迎研究方向相似的同仁们加我为好友，大家共同讨论，共同进步！
7楼2010-03-24 21:47:54
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amozhangna

金虫 (小有名气)
★
yusen_1982(金币+1):欢迎讨论！ 2010-03-25 08:10
angel2536(金币+1):谢谢 2010-03-25 14:53
对照组用的什么？DMSO的纯度没有什么影响的，我们用来做MTT的都是分析纯就可以了
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8楼2010-03-25 00:33:35
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angel2536

金虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by amozhangna at 2010-03-25 00:33:35:
对照组用的什么？DMSO的纯度没有什么影响的，我们用来做MTT的都是分析纯就可以了

我是做miRNA的，做增殖实验，对照用正常培养的细胞或者加入阴性对照（乱序的mIR）
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9楼2010-03-25 14:53:28
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