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angel2536

金虫 (著名写手)

[交流] 【交流】MTT实验,DMSO纯度/质量对最后的吸光度有很大影响么

求助各位大虾,我在做MTT实验时,最后测得吸光度值感觉很低,最高也就0.5-0.6左右吧!细胞密度接近90%了,孵育时间也够长3h左右,结晶很明显的。
由于刚做MTT,没有经验值,不知上述情况是否正常!
所用的DMSO可能是公司分装的,不知对结果又没有影响啊?
http://muchong.com/bbs/post.php?action=newthread&fid=286
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kong0908

铜虫 (著名写手)

Jesus Walks With Me!

angel2536(金币+1): 2010-03-24 11:04
DMSO对吸光度的影响 微乎其微
JesusWalksWithMe!
2楼2010-03-24 10:59:31
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firebolt

铁杆木虫 (著名写手)

angel2536(金币+1): 2010-03-24 13:58
DMSO没有什么影响。你用的量多大?测的哪个波长?
3楼2010-03-24 11:22:22
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angel2536

金虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by firebolt at 2010-03-24 11:22:22:
DMSO没有什么影响。你用的量多大?测的哪个波长?

用100ul成品DMSO,测570nm的,650nm为参考波长
4楼2010-03-24 13:58:02
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薰衣草儿

荣誉版主 (知名作家)

♡花语の恋♡

优秀版主


yusen_1982(金币+1):欢迎讨论! 2010-03-25 08:10
angel2536(金币+1): 2010-03-25 14:49
溶解的时候要摇晃10分钟的,你摇了吗?见过别人用分析纯的DMSO,也可以的~
     .* ☆.☆° *. ☆ ☆‘‘ ☆。      ☆☆。  *° ‘‘☆ ☆°*‘‘°'☆
5楼2010-03-24 14:57:37
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firebolt

铁杆木虫 (著名写手)

angel2536(金币+1):谢谢 2010-03-25 14:48
引用回帖:
Originally posted by angel2536 at 2010-03-24 13:58:02:

用100ul成品DMSO,测570nm的,650nm为参考波长

我们是每孔180ul培基+20ul MTT,培养4小时。然后吸净培基换成150ul DMSO,再摇15分钟,测570nm吸光度,空孔加纯DMSO对照,细胞对照组读数一般在1.0左右
6楼2010-03-24 19:57:13
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biology-jlu

木虫之王 (文坛精英)

angel2536(金币+1): 2010-03-25 14:53
0.5-0.6也可以用了吧?
大家好!我的研究方向为靶向纳米给药系统,欢迎研究方向相似的同仁们加我为好友,大家共同讨论,共同进步!
7楼2010-03-24 21:47:54
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amozhangna

金虫 (小有名气)


yusen_1982(金币+1):欢迎讨论! 2010-03-25 08:10
angel2536(金币+1):谢谢 2010-03-25 14:53
对照组用的什么?DMSO的纯度没有什么影响的,我们用来做MTT的都是分析纯就可以了
8楼2010-03-25 00:33:35
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angel2536

金虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by amozhangna at 2010-03-25 00:33:35:
对照组用的什么?DMSO的纯度没有什么影响的,我们用来做MTT的都是分析纯就可以了

我是做miRNA的,做增殖实验,对照用正常培养的细胞或者加入阴性对照(乱序的mIR)
9楼2010-03-25 14:53:28
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