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汕头大学海洋科学接受调剂
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nanhailiu

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】western急急急

我做的western,结果内参带是出来了,但是带的宽窄不同,且比较弱时由于什么原因啊。我最大的上样量是20ul。这是不是电泳的问题啊。电泳时带一跑到分离胶就开始弥散。不知道怎么回事啊。ph我都校对过了。谢谢大家帮忙啊
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匿名

用户注销 (著名写手)


amisking(金币+1): 2010-03-24 08:15
本帖仅楼主可见
3楼2010-03-24 04:49:46
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song123

银虫 (正式写手)


amisking(金币+1): 2010-03-24 08:15
nanhailiu(金币+1): 2010-03-30 08:42
这可能是因为到电泳的电压没设置好,在进入分离胶之前最好用小电压,如果还是弥散就再降低电压,将其在进入分离胶之前压成一条直线。
另外就是上样要仔细小心,别让样品溢出或让marker溢出。
还解决不了,我们再讨论。
书籍备而不读如废纸!
2楼2010-03-23 23:22:01
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fansanjin

新虫 (初入文坛)

tris-hcl的PH值不对,重新调一下PH值
4楼2010-03-24 10:45:11
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nanhailiu

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by 彬心玉壶 at 2010-03-24 04:49:46:
一跑到分离胶开始弥散?
不会吧,进入胶了就不会弥散了啊,一般浓缩胶可用80V,进入分离胶后用100V,是SDS-PAGE吗?没道理弥散啊,就算弥散也应该是在开始弥散,怎么会到分离胶的时候弥散呢?

我调过了,用ph计调的。
5楼2010-03-30 08:45:06
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