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nanhailiu

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】western急急急

我做的western,结果内参带是出来了,但是带的宽窄不同,且比较弱时由于什么原因啊。我最大的上样量是20ul。这是不是电泳的问题啊。电泳时带一跑到分离胶就开始弥散。不知道怎么回事啊。ph我都校对过了。谢谢大家帮忙啊
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zhouyinggyf

金虫 (正式写手)


scelab(金币+1): 2010-04-01 22:41
内参的宽窄不同可能是上样量不一致(要做蛋白浓度测定,计算出上样体积),也可能是胶配的不好,不均匀造成的。比较弱可能是抗体有问题,内参一般很亮的。也可能是上样量太小了。样品到分离胶前应该压成一条线。如果都不行,把可疑的东西都换了吧
11楼2010-04-01 22:39:43
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song123

银虫 (正式写手)


amisking(金币+1): 2010-03-24 08:15
nanhailiu(金币+1): 2010-03-30 08:42
这可能是因为到电泳的电压没设置好,在进入分离胶之前最好用小电压,如果还是弥散就再降低电压,将其在进入分离胶之前压成一条直线。
另外就是上样要仔细小心,别让样品溢出或让marker溢出。
还解决不了,我们再讨论。
书籍备而不读如废纸!
2楼2010-03-23 23:22:01
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匿名

用户注销 (著名写手)


amisking(金币+1): 2010-03-24 08:15
本帖仅楼主可见
3楼2010-03-24 04:49:46
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fansanjin

新虫 (初入文坛)

tris-hcl的PH值不对,重新调一下PH值
4楼2010-03-24 10:45:11
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