应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】鲑鱼精DNA怎么处理啊
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
61/1返回列表
查看: 5934  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

bellams

[交流] 【求助/交流】鲑鱼精DNA怎么处理啊 已有1人参与

我最近想用氯化锂的方法做转化酵母，但是不知道鲑鱼精DNA要怎么处理，看到网页上有一种处理方法，也不是很明白，想请教你一下。
鲑鱼精DNA

说明：生化研究。
CAS＃：9007-49-2
外观：白色线状
特性：Linkage：Formerly listed as Type III
溶解性：溶于水，参考浓度2mg/ml
储存条件：2-8℃
From Sigma D1626
Salmon DNA 的配制：
组份浓度10 mg/ml Salmon DNA ;配制量约100 ml
配制方法:
1. 称取鲑鱼精DNA 2 g置于500 ml烧杯中，加入约200 ml的TE Buffer。
2. 用磁力搅拌器室温搅拌2～4小时，溶解后加入4 ml的5 M NaCl，
使其终浓度为0.1 M。
3. 用苯酚和苯酚/氯仿各抽提1次。4. 回收水相溶液后，使用17号皮下注射针头快速吸打溶液约20
次，以切断DNA。
5. 加入2倍体积的预冷乙醇进行乙醇沉淀。
6. 离心回收DNA后，溶解于100 ml的去离子水中，测定溶液的OD260值。
7. 计算溶液的DNA浓度后，稀释DNA溶液至10 mg/ml。
8. 煮沸10分钟后，分装成小份(1 ml/份)。-20℃保存。
9. 使用前在沸水浴中加热5分钟后，迅速冰浴冷却。

第3步中苯酚和氯仿的用量是多少啊，我查了很久，都没找到。
还有第五步中的乙醇用的是无水乙醇吗？
请做过这个实验的大侠指点一下。
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

蛋白表达纯化鉴定精华

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-03-23 09:07:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1，一般抽提时所加的苯酚或者苯酚/氯仿体积应该等同于你要抽提的体系。
2，是的
赞一下(1人) 回复此楼
Thank-you，so-blue.
2楼2010-03-23 15:10:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bellams

引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2010-03-23 15:10:13:
1，一般抽提时所加的苯酚或者苯酚/氯仿体积应该等同于你要抽提的体系。
2，是的

谢谢你！那苯酚/氯仿的体积比试1:1吗？
赞一下 回复此楼
3楼2010-03-23 15:53:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaolef4s

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
转化酵母要求没那么高，直接加水至合适浓度，在沸水中煮10分钟溶解即可直接使用。不用那么麻烦。
赞一下(1人) 回复此楼
这一切都会过去！
4楼2010-03-23 16:27:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bellams

引用回帖:
Originally posted by gaolef4s at 2010-03-23 16:27:17:
转化酵母要求没那么高，直接加水至合适浓度，在沸水中煮10分钟溶解即可直接使用。不用那么麻烦。

啊？真的吗？我买的是粉末，这么简单的处理可以吗
赞一下 回复此楼
5楼2010-03-23 19:23:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

白云恪

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我最近也在做，买的也是粉末，也不知道怎么处理呢，期待高手进来
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2010-11-29 16:53:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 bellams 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703化学321分求调剂 +3 三dd. 2026-03-30 4/200 2026-03-30 14:50 by JourneyLucky
[考研] 286分调剂 +7 Faune 2026-03-30 7/350 2026-03-30 13:26 by 帕尔马拉特
[考研] 材料工程专硕求调剂 +6 hyl3153942 2026-03-29 6/300 2026-03-30 12:04 by 1018329917
[考研] 334分 一志愿武理 材料求调剂 +12 李李不服输 2026-03-26 12/600 2026-03-30 10:33 by 我是小康
[考研] 求调剂 +6 家佳佳佳佳佳 2026-03-29 6/300 2026-03-30 06:48 by zhyzzh
[考研] 求调剂 +4 QiMing7 2026-03-25 5/250 2026-03-29 21:10 by 唐沐儿
[考研] 环境工程 085701，267求调剂 +6 minht 2026-03-29 6/300 2026-03-29 16:21 by 学员8dgXkO
[考研] 332求92调剂 +8 蕉蕉123 2026-03-28 8/400 2026-03-29 10:46 by 周梓丹
[考研] 356求调剂 +3 gysy?s?a 2026-03-28 3/150 2026-03-29 00:33 by 544594351
[考研] 311（085601）求调剂 +4 liziyeyeye 2026-03-28 4/200 2026-03-28 18:50 by 535743368
[考研] 070300化学求调剂 +4 起个名咋这么难 2026-03-27 4/200 2026-03-27 21:39 by 83503孙老师
[考研] 085600材料与化工调剂 +10 A-哆啦Z梦 2026-03-23 16/800 2026-03-27 15:13 by caszguilin
[考研] 085600，材料与化工321分，求调剂 +9 大馋小子 2026-03-27 9/450 2026-03-27 14:30 by mmm just
[考研] 305求调剂 +5 哇卢卡库 2026-03-26 5/250 2026-03-27 14:01 by laoshidan
[考研] 322求调剂 +4 我真的很想学习 2026-03-23 4/200 2026-03-27 13:51 by 杨杨杨紫
[考研] 316求调剂 +5 Pigcasso 2026-03-24 5/250 2026-03-27 12:10 by zhshch
[考研] 考研调剂 +9 小蜡新笔 2026-03-26 9/450 2026-03-27 11:10 by 不吃魚的貓
[考研] 336材料求调剂 +7 陈滢莹 2026-03-26 9/450 2026-03-27 00:20 by wxiongid
[考研] 085602化学工程求调剂。 +4 平乐乐乐 2026-03-26 4/200 2026-03-26 17:57 by fmesaito
[考研] 一志愿天津大学339材料与化工求调剂 +3 江往卖鱼 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:42 by 王小欠i
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭