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shenyang24

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助】细胞粘附评价指标

请问细胞在材料表面粘附行为有哪些比较公认的评价指标
即,细胞在材料表面粘附可以用哪些实验来评价?比如说SEM观察粘附状态,荧光标记计数等

什么样的细胞计数方法最客观。请告知大致的实验方法

万分感谢!
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god1985

银虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
zhangwj(金币+3):谢谢应助 2010-03-21 11:31
要视情况而定,一般有三种
1. MTT- cell viability: 如果是只有一种细胞的话,也就是不含有stem cell分化,viability可间接表征细胞的数量,也就是说细胞数多的话,MTT的OD值就高,这是现在采用的比较常规的方法
2. DNA检测,就是把细胞破碎后,采用Heochst染色DNA后进行细胞数的表征,这种方法比较专业,误差也小,但实验操作要求及成本估计较高(自身没做过,猜想)
3. 红细胞计数板计数,算细胞数量的一种方法,简单地说就是取大块区域中的一块,看看有多少个细胞,推出大区域中总的细胞数,可自己查查,误差个人感觉挺大得,在细胞种植于支架前,常用此法进行种植细胞多少的测定
以上三种各有优劣,如果是详细表征的话,细胞的proliferation最好用DNA表征,如果只是对材料的相容性或简单的评价,可采用MTT,第3种一般用得很少
2楼2010-03-21 11:24:26
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shenyang24

木虫 (正式写手)

感谢god1985  耐心详细的解答。常规来说,确实是您说的几种方法,尤其以MTT最常用。
但MTT法对我的实验来说不太适用,因为材料样品面积无法控制完全一致。Heochst染色细胞核后可不破碎细胞可以直接用荧光显微镜观察,随机选择5个区域,进行细胞计数的表征。
我有看到文章是将材料连同表面粘附的细胞进行低速离心或机械震荡,去除粘附不紧密的细胞,再计数。
3楼2010-03-21 11:37:38
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