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xiaomu3811

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】这是我的电泳图片,请各位大侠给点建议....谢谢!!!

我最近提了几株真菌的DNA,PCR,并电泳检测.用ITS1-f 和 ITS4做得PCR,电泳检测结果却发现条带有好多不单一(如下图片所示)。理想的话,我个人觉得每一株菌PCR跑出的条带应该是单一的。我现在正为这个犯愁,求各位大侠,指点指点下一步该怎么办?能不能直接用于测序?测序的话,应该选那个带?谢谢!!!(另我实验目的之一是对每株菌的ITS区测序。)
   以下是我的电泳照片:请给点建议!!!!谢谢各位大侠.....


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xiaomu3811

金虫 (小有名气)

我是初学者,没上传成功ITS区的电泳照片,不过仅看文字也能知道我的难处。请各位大侠给点建议....
2楼2010-03-19 19:54:12
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jlzkchong

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
司马诸葛(金币+2): 2010-03-19 21:41
有可能是你PCR引物的特异性不是很好,所以导致你扩增出来的条带不唯一~建议你先调整PCR体系(尤其是退货温度),重做PCR,多试几次还不行,那最好重新设计引物~如果你已经知道你要得到的PCR条带有多大,那么根据MARKER判断位置大小对以后。可以酶切回收,连T载体后送测序~个人意见,仅供参考~
3楼2010-03-19 21:29:17
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lly198784

木虫 (正式写手)

怎么看不到你的?
4楼2010-03-20 17:15:54
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lly198784

木虫 (正式写手)

怎么看不到你的图?
5楼2010-03-20 17:16:12
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