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angel2536金虫 (著名写手)
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[交流]
【求助】MTT实验中参考波长650nm表示什么？
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新手请教： 在做MTT实验时，设置：测量波长570，参考波长650nm。 请问参考波长有什么用？ 为什么单波长和双波长测量的OD值有差别，单波长的值要大些？ http://muchong.com/bbs/post.php?action=newthread&fid=286 |
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angel2536(金币+3):我查了下，你说的有道理 2010-03-19 16:12
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我理解的不知道对不对 MTT甲瓒的主要吸引在480-630nm之间，最高在570-600之间（水溶液中, 在DMSO中有所变化，往低波长移动）（Transplantation Proceedings, 34, 3419–3421 (2002)），MTT主要吸收在480nm以下。 MTT测试中有几个因素会对结果产生干扰：一、细胞碎片的沉淀，会影响透过率，增大吸光值，所以有时候明明细胞死了很多，吸光值却很大；二、细胞板各个孔不平或者其他杂质沉淀，特别是很多实验室做MTT这种实验都用旧板子做； 因为这些因素是使各个波长吸收都增大，所以参考波长相当于一个本底(MTT在参考波长及以上波长吸收很小），扣除以上因素的影响。 文献见链接： http://www.namipan.com/d/mtt.pdf ... ab3df7074a89d1e0100 [ Last edited by qingbo62 on 2010-3-19 at 11:49 ] |
2楼2010-03-19 11:48:03
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angel2536
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迷惑啊5楼2010-03-19 19:57:24
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