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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 【求助】请教大家一个酶催化的问题
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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zeroron

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】请教大家一个酶催化的问题

我做一个酶催化的酯类水解反应。试了NOVOZYM 435等很多商品脂肪酶，蛋白酶，但是都没有催化结果。用的酶量应该还算大大过量（底物浓度非常低，1mM）
结果我用自己培养的细菌，用细菌破碎液来催化水解。结果在破碎液量非常大的时候才有很明显的催化效果。（我5ml体系，测出破碎液加得越多底物转化率就越大，最后我干脆全部用细菌破碎液加上底物和一点有机溶剂来反应）
我感觉我使用了太多的酶（细菌破碎液），这样感觉很奇怪。特别是相对我这个很低的底物浓度，一般的反应不需要很多酶就可以了，不知道大家怎么看这个问题呢？有牛人给我点指导吗？谢谢大家啦！
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1楼 2010-03-16 21:30:43
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yubeihong

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
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lwb1987521(金币+1):感谢交流 2010-03-17 16:41
具体底物和细菌都不说，别人怎么帮你分析！
酶活也没测
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2楼2010-03-17 09:09:40
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zeroron

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yubeihong at 2010-03-17 09:09:40:
具体底物和细菌都不说，别人怎么帮你分析！
酶活也没测

sorry,我用的是枯草芽孢杆菌，酶活之前用pnpA测过，还比较高（相对于NOVO435），我实验时加的酶活肯定大大高于之前测酶活时的用量了。
底物是一个头孢类化合物的酯类
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3楼2010-03-17 10:13:24
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chenyyy

无虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lwb1987521(金币+1):感谢交流 2010-03-17 16:42
酶的专一性不对。。。再多筛几种酶吧
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4楼2010-03-17 11:57:33
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zeroron

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by chenyyy at 2010-03-17 11:57:33:
酶的专一性不对。。。再多筛几种酶吧

我试过了435等很多商品酶了，在合理的酶量下都没有明显催化效果。
那我现在这样可以发文章吗?
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5楼2010-03-17 16:10:32
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yubeihong

铁杆木虫 (职业作家)
反应体系是均相？
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6楼2010-03-18 10:23:41
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zeroron

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yubeihong at 2010-03-18 10:23:41:
反应体系是均相？

是水相和一定量的DMSO
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7楼2010-03-19 10:10:34
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