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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】his-tag的切除
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小白3521

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】his-tag的切除 已有3人参与

我纯化出来的蛋白想用肠激酶切掉his-tag，有没有哪位朋友做过这方面的实验啊
告诉一下具体步骤和注意事项啊
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1楼 2010-03-16 14:57:33
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小白3521

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by snoopyzxx at 2010-04-06 22:07:21:
透析到tris9.0的缓冲中，直接加EK酶就可以了。切割效率要分不同的蛋白，有的很好切的，有的不行。不能一概而论。
如果做药，很多是要切掉的，所以制药的话一般可能不太用这种融合表达的。

我的蛋白只有12kd，his-tag有5kd，我不是做药的，是研究这个蛋白的输水区对化学物质结合能力，有必要切掉吗，我最近切了一次，都没切动，哎
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13楼2010-04-07 08:55:05
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hihoney

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
为什么要切掉？

商业化的东西，对活性影响不会大。
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2楼2010-03-16 22:02:51
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weilin1005

木虫 (正式写手)

副教授
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
按照肠激酶的说明做就可以了。
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3楼2010-03-16 23:21:08
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mofatuzi

新虫 (小有名气)
要切标签，一般都很难。即使商业化，实际效率也不高。
不影响使用就不要切了
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5楼2010-03-17 10:58:02
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