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小白3521

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】his-tag的切除 已有3人参与

我纯化出来的蛋白想用肠激酶切掉his-tag,有没有哪位朋友做过这方面的实验啊
告诉一下具体步骤和注意事项啊
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小白3521

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by snoopyzxx at 2010-04-06 22:07:21:
透析到tris9.0的缓冲中,直接加EK酶就可以了。切割效率要分不同的蛋白,有的很好切的,有的不行。不能一概而论。
如果做药,很多是要切掉的,所以制药的话一般可能不太用这种融合表达的。

我的蛋白只有12kd,his-tag有5kd,我不是做药的,是研究这个蛋白的输水区对化学物质结合能力,有必要切掉吗,我最近切了一次,都没切动,哎
13楼2010-04-07 08:55:05
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hihoney

铁杆木虫 (职业作家)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
为什么要切掉?

商业化的东西,对活性影响不会大。
2楼2010-03-16 22:02:51
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weilin1005

木虫 (正式写手)

副教授


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
按照肠激酶的说明做就可以了。
3楼2010-03-16 23:21:08
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mofatuzi

新虫 (小有名气)

要切标签,一般都很难。即使商业化,实际效率也不高。
不影响使用就不要切了
5楼2010-03-17 10:58:02
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