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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】his-tag的切除
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小白3521

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】his-tag的切除 已有3人参与

我纯化出来的蛋白想用肠激酶切掉his-tag，有没有哪位朋友做过这方面的实验啊
告诉一下具体步骤和注意事项啊
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1楼 2010-03-16 14:57:33
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hihoney

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
为什么要切掉？

商业化的东西，对活性影响不会大。
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2楼2010-03-16 22:02:51
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weilin1005

木虫 (正式写手)

副教授
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
按照肠激酶的说明做就可以了。
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3楼2010-03-16 23:21:08
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weilin1005

木虫 (正式写手)

副教授
先透析，再切。
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4楼2010-03-16 23:23:08
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mofatuzi

新虫 (小有名气)
要切标签，一般都很难。即使商业化，实际效率也不高。
不影响使用就不要切了
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5楼2010-03-17 10:58:02
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wordsworth3180

木虫 (正式写手)
这个酶效率挺低的 不太好切
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6楼2010-03-17 12:16:09
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dreamofyou

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我用的是QIAGEN的DPAase, 效果还不错，不过超级贵
要先透析的
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7楼2010-03-17 13:46:44
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cascc

铜虫 (小有名气)
HIS一般不用切啊，如果真的不喜欢标签，还是用NEB公司的具有内肽酶的载体，调下PH标签就切掉了。呵呵
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8楼2010-03-17 20:18:53
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yangjunzju

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by dreamofyou at 2010-03-17 13:46:44:
我用的是QIAGEN的DPAase, 效果还不错，不过超级贵
要先透析的

那到底有多贵呢？
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9楼2010-03-17 21:15:08
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小白3521

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by wordsworth3180 at 2010-03-17 12:16:09:
这个酶效率挺低的 不太好切

你有用过吗？
我现在想买带his标签的重组肠激酶
那样的话 再过一遍镍柱就能同时把肠激酶也去掉
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10楼2010-03-17 21:28:45
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