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小白3521

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】his-tag的切除 已有3人参与

我纯化出来的蛋白想用肠激酶切掉his-tag,有没有哪位朋友做过这方面的实验啊
告诉一下具体步骤和注意事项啊
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hihoney

铁杆木虫 (职业作家)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
为什么要切掉?

商业化的东西,对活性影响不会大。
2楼2010-03-16 22:02:51
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weilin1005

木虫 (正式写手)

副教授


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
按照肠激酶的说明做就可以了。
3楼2010-03-16 23:21:08
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weilin1005

木虫 (正式写手)

副教授

先透析,再切。
4楼2010-03-16 23:23:08
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mofatuzi

新虫 (小有名气)

要切标签,一般都很难。即使商业化,实际效率也不高。
不影响使用就不要切了
5楼2010-03-17 10:58:02
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wordsworth3180

木虫 (正式写手)

这个酶效率挺低的 不太好切
6楼2010-03-17 12:16:09
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dreamofyou

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我用的是QIAGEN的DPAase, 效果还不错,不过超级贵
要先透析的
7楼2010-03-17 13:46:44
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cascc

铜虫 (小有名气)

HIS一般不用切啊,如果真的不喜欢标签,还是用NEB公司的具有内肽酶的载体,调下PH标签就切掉了。呵呵
8楼2010-03-17 20:18:53
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yangjunzju

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by dreamofyou at 2010-03-17 13:46:44:
我用的是QIAGEN的DPAase, 效果还不错,不过超级贵
要先透析的

那到底有多贵呢?
9楼2010-03-17 21:15:08
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小白3521

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by wordsworth3180 at 2010-03-17 12:16:09:
这个酶效率挺低的 不太好切

你有用过吗?
我现在想买带his标签的重组肠激酶
那样的话 再过一遍镍柱就能同时把肠激酶也去掉
10楼2010-03-17 21:28:45
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