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[交流]
【求助/交流】酵母菌液PCR
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做了好几次，都没有成功，方法就是配好体系后，加上一微升的酵母菌液直接在PCR仪上扩，怎么就是没有产物 而用大肠杆菌的菌液扩增效果很好，想问一下用酵母菌液做模板时是不是还需要一些预处理？ [ Last edited by 小猫三两只 on 2010-3-14 at 11:47 ] |
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8楼2010-03-17 11:09:53
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告诉你一个简单的方法： • Use a pipetman tip to transfer yeast cells (about this much: • ) to 30 microliters of 0.2% SDS. JuanJo had success using a pellet of 3 x 106 cells from a liquid culture. • Vortex ~15 seconds • Heat in hot block for 4 min at 90 deg. • Spin in microfuge 1 min. Remove supernatant to a new tube. 之后稀释10倍，按照常规PCR加入上述模板去做。 |
9楼2010-03-17 20:26:46