应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】毛细管电泳和液相方面的
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
71/1返回列表
查看: 548  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

zhujiren

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助】毛细管电泳和液相方面的

我现在正在做的课题是酶催化蛋白和果胶之间的反应，希望两者能够通过共价键结合起来。所以选择了毛细管电泳作为分析检测手段。蛋白用的是酪蛋白，分子量6000多，果胶也是多聚物，分子量也在2-3万。第一次用的时候，选择的是CE自由区带柱（我自己觉得是，因为是裸管直接跑电泳），运行缓冲液和电极缓冲液我都用的是硼酸-Tris-EDTA，PH9.5，75um/60cm柱,不知道这个缓冲液体系以及CE分离模式适不适合分离蛋白与果胶以及他们的反应产物，还怎么改进？做了一次发现很不稳定，同一样品前后两次差很多。不知道是不是仪器刚开始不稳定，需要跑几个样才能稳定。
     还有我之前也用过SDS-PAGE电泳，但是总是不理想，现在想试试HPLC或者凝胶色谱法，根据我的样品及实验目的（就是想证明蛋白-果胶能够共价链接，分子量有显著变化），看有什么样的凝胶色谱条件比较合适。真诚恳求高人指点，助人为乐嘛。方便的话把意见发我邮箱：shenlong1000@gmail.com
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2010-03-12 14:23:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

platto

木虫 (著名写手)

一窍不通
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
佳怡(金币+3):3Q~ 2010-03-12 18:52
蛋白质非常容易在裸管上发生吸附等行为的，由此造成重现性差，稳定性差等问题；解决办法有几种，最好选用商品化的蛋白质分析毛细管，再就是自己制备可以消除蛋白质在毛细管内壁吸附的毛细管，如线性丙烯酰胺凝胶毛细管；如果你分析的蛋白质分子量不是很大，可以使用较高浓度，且富含氨基的buffer，但这个方法虽然操作简便，但效果也较差。
赞一下(3人) 回复此楼
七窍通了六窍
2楼2010-03-12 14:54:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhujiren

新虫 (小有名气)
那我选择凝胶色谱行吗？或者在毛细管电泳缓冲液中添加其他的添加剂，减少吸附？
赞一下 回复此楼
3楼2010-03-12 15:28:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

patent000

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可以选择凝胶柱，有专门用来测分子量的HPLC凝胶柱，你可以问一下
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2010-03-12 15:34:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhujiren

新虫 (小有名气)
谢谢高人！
回复此楼
5楼2010-03-12 20:19:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

platto

木虫 (著名写手)

一窍不通
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
如果你想用CE加入添加剂来分离分析的话，你要考虑一下你的蛋白质是否会变性，以及变性后对你的分析有无影响
赞一下(1人) 回复此楼
七窍通了六窍
6楼2010-03-14 11:34:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhujiren

新虫 (小有名气)
我的反应体系里就一种蛋白和一种果胶，可能会有反应产物，所以蛋白变性影响应该不大吧？我想问问，分离蛋白与果胶用硼酸—tris（PH9.5及以上）的缓冲液有效吗？有人建议我换柱子，不用裸管（避免蛋白吸附），你觉得有必要吗？因为我主要是想看看有没有反应，通过分子量看的话应该会很直观，您看凝胶色谱有效吗？凝胶色谱是指一般的柱色谱（灌特定凝胶，如葡聚糖），还是HPLC中的凝胶色谱？谢谢解答！
赞一下 回复此楼
7楼2010-03-14 13:37:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zhujiren 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 366求调剂 +7 sbdnd 2026-04-03 7/350 2026-04-03 12:40 by cymywx
[考研] 265求调剂 +16 梁梁校校 2026-04-01 16/800 2026-04-03 12:33 by nalakaiqi
[考研] 初试成绩337找调剂 +3 ??? ?. ? 2026-04-03 3/150 2026-04-03 11:43 by 土木硕士招生
[考研] 321求调剂 +8 认真求上学 2026-04-02 8/400 2026-04-03 11:16 by Yuena_Wang
[考研] 一志愿安徽大学0817化学工程与技术，求调剂 +14 我不是只因 2026-04-02 15/750 2026-04-03 09:49 by 蓝云思雨
[考研] 282求调剂 +18 ycy1201 2026-04-01 20/1000 2026-04-02 16:39 by liumengping
[考研] 初试301，代码085701环境工程，本硕一致，四六级已过，有二区一作，共发表5篇论文 +6 axibli 2026-04-01 6/300 2026-04-02 13:42 by Ecowxq666！
[考研] 290求调剂085701 +3 1314捧花 2026-04-02 3/150 2026-04-02 13:34 by Ecowxq666！
[考研] 265求调剂11408 +4 刘小鹿lu 2026-03-27 4/200 2026-04-02 11:27 by guyan1000
[考研] 266求调剂 +4 学员97LZgn 2026-04-02 4/200 2026-04-02 09:52 by yulian1987
[考研] 材料求调剂 +10 呢呢妮妮 2026-04-01 13/650 2026-04-02 09:17 by olim
[考研] 化学工程专硕324分，一志愿中国矿业大学求调剂 +7 耿耿1314 2026-04-01 7/350 2026-04-02 07:40 by 尚水阁主
[考研] 材料专硕调剂 +17 椰椰。 2026-03-29 17/850 2026-04-01 20:44 by cq2548
[考研] 285求调剂 +7 AZMK 2026-03-30 13/650 2026-04-01 17:00 by 七度不信任
[考研] 0710生物学考研调剂 +3 李多米lee. 2026-03-27 4/200 2026-04-01 16:21 by zzchen2000
[考研] 一志愿华南师范361分，化学求调剂 +4 Nicole88888 2026-04-01 4/200 2026-04-01 10:08 by 唐沐儿
[考研] 土木304求调剂 +3 兔突突突， 2026-03-31 3/150 2026-04-01 09:42 by JourneyLucky
[考研] 0710生物学求调剂！ +6 叙述文 2026-03-31 6/300 2026-04-01 09:39 by JourneyLucky
[考研] 求收留 +8 1943443204 2026-03-28 8/400 2026-03-31 15:00 by -迷了路啊路
[考研] 一志愿华中师范化学332分求调剂 +3 Lyy930824@ 2026-03-29 3/150 2026-03-30 20:15 by DHUSHUAI
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭