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zhujiren新虫 (小有名气)
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【求助】毛细管电泳和液相方面的
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我现在正在做的课题是酶催化蛋白和果胶之间的反应，希望两者能够通过共价键结合起来。所以选择了毛细管电泳作为分析检测手段。蛋白用的是酪蛋白，分子量6000多，果胶也是多聚物，分子量也在2-3万。第一次用的时候，选择的是CE自由区带柱（我自己觉得是，因为是裸管直接跑电泳），运行缓冲液和电极缓冲液我都用的是硼酸-Tris-EDTA，PH9.5，75um/60cm柱,不知道这个缓冲液体系以及CE分离模式适不适合分离蛋白与果胶以及他们的反应产物，还怎么改进？做了一次发现很不稳定，同一样品前后两次差很多。不知道是不是仪器刚开始不稳定，需要跑几个样才能稳定。 还有我之前也用过SDS-PAGE电泳，但是总是不理想，现在想试试HPLC或者凝胶色谱法，根据我的样品及实验目的（就是想证明蛋白-果胶能够共价链接，分子量有显著变化），看有什么样的凝胶色谱条件比较合适。真诚恳求高人指点，助人为乐嘛。方便的话把意见发我邮箱：shenlong1000@gmail.com |
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