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zhujiren新虫 (小有名气)
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【求助】毛细管电泳和液相方面的
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我现在正在做的课题是酶催化蛋白和果胶之间的反应,希望两者能够通过共价键结合起来。所以选择了毛细管电泳作为分析检测手段。蛋白用的是酪蛋白,分子量6000多,果胶也是多聚物,分子量也在2-3万。第一次用的时候,选择的是CE自由区带柱(我自己觉得是,因为是裸管直接跑电泳),运行缓冲液和电极缓冲液我都用的是硼酸-Tris-EDTA,PH9.5,75um/60cm柱,不知道这个缓冲液体系以及CE分离模式适不适合分离蛋白与果胶以及他们的反应产物,还怎么改进?做了一次发现很不稳定,同一样品前后两次差很多。不知道是不是仪器刚开始不稳定,需要跑几个样才能稳定。 还有我之前也用过SDS-PAGE电泳,但是总是不理想,现在想试试HPLC或者凝胶色谱法,根据我的样品及实验目的(就是想证明蛋白-果胶能够共价链接,分子量有显著变化),看有什么样的凝胶色谱条件比较合适。真诚恳求高人指点,助人为乐嘛。方便的话把意见发我邮箱:shenlong1000@gmail.com |
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