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geminiww

木虫 (职业作家)

猪家族~~哑巴猪

[交流] 【求助/交流】丙酮能使固定化酶失活吗? 已有2人参与

有做固定化酶的虫友吗?固定化酶的回收多用丙酮洗涤,丙酮不能使酶失活吗?我们测酶活的终止剂就是丙酮和乙醇的混合溶液啊。。有点搞不明白。。
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爱生活。。
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geminiww

木虫 (职业作家)

猪家族~~哑巴猪

引用回帖:
Originally posted by yyayq at 2010-09-03 08:53:22:
我直接用95%乙醇做变性剂,

我的氨基纳米载体一经戊二醛修饰,然后再洗去游离的戊二醛,洗了5、6遍,再向醛基修饰的纳米载体中加酶溶液固定化,结果是固定化酶没有活性,上清里也没有活性,而按照上清蛋白分析 ...

测过你的原酶溶液的酶活吗?是不是原酶液本身已经失活了?
减少戊二醛的用量试试,戊二醛对酶活影响挺大的,游离的戊二醛没洗干净可能会使酶液中游离酶也失活吧。
爱生活。。
4楼2010-09-04 09:20:45
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geminiww

木虫 (职业作家)

猪家族~~哑巴猪

没有人解答,我来解答吧,我用丙酮处理游离酶12h,和没经过处理的游离酶,相同条件下检测酶活,用丙酮处理过的酶酶活反而高,当然也可能是实验误差造成的,但可以大概说明,丙酮不会使酶失活。。
爱生活。。
2楼2010-03-17 16:10:13
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yyayq

银虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):鼓励交流,实验要加油咯~ 2010-09-03 10:10:41
我直接用95%乙醇做变性剂,

我的氨基纳米载体一经戊二醛修饰,然后再洗去游离的戊二醛,洗了5、6遍,再向醛基修饰的纳米载体中加酶溶液固定化,结果是固定化酶没有活性,上清里也没有活性,而按照上清蛋白分析结果,应该有60%的酶固定化上了,做了很多遍都是这样,找不出原因啊
3楼2010-09-03 08:53:22
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