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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】丙酮能使固定化酶失活吗？
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geminiww

木虫 (职业作家)

猪家族~~哑巴猪

[交流] 【求助/交流】丙酮能使固定化酶失活吗？ 已有2人参与

有做固定化酶的虫友吗？固定化酶的回收多用丙酮洗涤，丙酮不能使酶失活吗？我们测酶活的终止剂就是丙酮和乙醇的混合溶液啊。。有点搞不明白。。
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爱生活。。
1楼 2010-03-10 16:13:20
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yyayq

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):鼓励交流，实验要加油咯~ 2010-09-03 10:10:41
我直接用95%乙醇做变性剂，

我的氨基纳米载体一经戊二醛修饰，然后再洗去游离的戊二醛，洗了5、6遍，再向醛基修饰的纳米载体中加酶溶液固定化，结果是固定化酶没有活性，上清里也没有活性，而按照上清蛋白分析结果，应该有60%的酶固定化上了，做了很多遍都是这样，找不出原因啊
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3楼2010-09-03 08:53:22
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geminiww

木虫 (职业作家)

猪家族~~哑巴猪
没有人解答，我来解答吧，我用丙酮处理游离酶12h，和没经过处理的游离酶，相同条件下检测酶活，用丙酮处理过的酶酶活反而高，当然也可能是实验误差造成的，但可以大概说明，丙酮不会使酶失活。。
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爱生活。。
2楼2010-03-17 16:10:13
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geminiww

木虫 (职业作家)

猪家族~~哑巴猪
引用回帖:
Originally posted by yyayq at 2010-09-03 08:53:22:
我直接用95%乙醇做变性剂，

我的氨基纳米载体一经戊二醛修饰，然后再洗去游离的戊二醛，洗了5、6遍，再向醛基修饰的纳米载体中加酶溶液固定化，结果是固定化酶没有活性，上清里也没有活性，而按照上清蛋白分析 ...

测过你的原酶溶液的酶活吗？是不是原酶液本身已经失活了？
减少戊二醛的用量试试，戊二醛对酶活影响挺大的，游离的戊二醛没洗干净可能会使酶液中游离酶也失活吧。
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爱生活。。
4楼2010-09-04 09:20:45
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