| 查看: 602 | 回复: 4 | ||
| 【奖励】 本帖被评价3次，作者度百增加金币 2 个 | ||
| 当前主题已经存档。 | ||
[资源]
【分享】总RNA 的提取
|
||
|
Trizol 法提取RNA 在收集到生物材料之后，最好能即刻进行RNA 制备工作。若需暂时储存， 则应以液氮将生物材料急速冷冻后，储存于-80℃冷冻柜。在制备RNA 时，将储 存于冷冻柜的材料取出，立即以加入液氮研磨的方式打破细胞，不可以先行解冻， 以避免RNase 的作用。 1. 提取组织 RNA 时，每50～100mg 组织用1ml Trizol 试剂对组织进行裂解；提 取细胞RNA 时，先离心沉淀细胞，每5-10 ╳106 个细胞加1ml Trizol 后，反 复用枪吹打或剧烈振荡以裂解细胞； 2. 将上述组织或细胞的 Trizol 裂解液转入EP管中,在室温15~30C下放置5 分钟； 3. 在上述 EP 管中，按照每1ml TRIZOL 加0.2ml 氯仿的量加入氯仿，盖上EP 管盖子，在手中用力震荡15 秒，在室温下（15℃～30℃）放置2～3 分钟后， 12000g（2℃～8℃）离心15 分钟； 4. 取上层水相置于新 EP 管中,按照每1ml TRIZOL 加0.5ml 异丙醇的量加入异丙 醇，在室温下（15℃～30℃）放置10 分钟,12000g（2℃～8℃）离心10 分钟； 5. 弃上清，按照每 1ml TRIZOL 加1ml 75%乙醇进行洗涤，涡旋混合，7500g （2℃～8℃）离心5 分钟，弃上清； 6. 让沉淀的 RNA 在室温下自然干燥； 7. 用 Rnase-free water 溶解RNA 沉淀。 |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有59人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
2楼2010-03-07 18:32:02
3楼2010-03-07 20:17:11
4楼2010-03-07 23:23:25
5楼2010-03-08 10:26:46
