| 查看: 294 | 回复: 2 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
| 【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 微笑漩涡 的 4 个金币 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
微笑漩涡新虫 (著名写手)
|
[交流]
【求助/交流】做过TAIL-PCR的大侠帮忙哈
|
||
|
最近做兼并PCR获得一个约500bp的核酸片段，想通过TAIL-PCR获得全长。 但是不知道在这个PCR中 低退火温度的随机引物（AD）如何设计。 我的基因组是宏基因组，不能确定物种。 劳烦做过的大侠回答。谢谢 |
回复此楼» 猜你喜欢
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有297人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
化工申博
已经有3人回复
-
申博自荐
已经有2人回复
-
广西民族大学化学化工学院化学工程与技术学硕，材料化工专硕调剂名额充足！
已经有0人回复
★ ★ ★
1949stone(金币+3): 2010-03-06 20:48
1949stone(金币+3): 2010-03-06 20:48
|
不好意思，我误导你了，我做的时候就是用刘的那个随机引物，但是换其他物种不一定能够做出来， 可以根据已知序列设计3 个与其边界距离不等的嵌套的特异性引物,特异性引物的长度约20 bp , Tm 一般为58～68 ℃。再按照物种普遍存在的蛋白质的保守氨基酸序列设计一系列简并引物,简并引物相对较短,长度为14 bp , Tm 为30～48 ℃。 兼并引物你会设计吧，用你要扩增的物种的近缘物种的蛋白质序列进行blast，找出保守序列，用primer primer5.0把保守的氨基酸反过来翻译成核酸的兼并序列， 获得侧翼序列除了tail-PCR还有genome walking（就是酶切之后加接头的那种） |
3楼2010-03-06 20:35:32
2楼2010-03-06 09:52:58
