| 查看: 2185 | 回复: 12 | |||
dy_414木虫 (正式写手)
|
[交流]
【求助/交流】关于scFv的二硫键复性 已有2人参与
|
|
本人在做单链抗体scFv，为了提高分子稳定性在VH和VL中间突变了一个链间二硫键（G-C，S-C）然后进行复性。现在用的方法是滴定复性，反应体系pH为8.1（蛋白等电点大约在6.8）thiol-disulfide exchange反应的电势由GSSG/GSH (1:10)提供。试过很多条件，包括体系pH，GSSG/GSH浓度及比例，复性液中变性剂浓度等等，但是始终没有特别好的结果。有过一次稳定性不错的实验，但是非还原电泳显示复性的蛋白是一个混合物. 目前已经请教了几乎能请教到的老师和博士，大家把能出的主意都出了，但是几乎没有像样的数据（文献很多都可以，但是没有一个能重复出来的）。望诸位高手给予协助，谢谢！ |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有272人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 考博复试结束，是后补争选名额，录取可能性大吗？
已经有24人回复
- 请教关于质谱的几个问题
已经有10人回复
- 请教关于方法学验证的相关问题
已经有14人回复
- 能不能用第一性原理方法计算陶瓷基复合材料性质？
已经有4人回复
- 用硫化钠能打开二硫键吗？
已经有4人回复
- 二硫键打开的问题
已经有15人回复
- 关于蛋白复性后的活性检测
已经有8人回复
dy_414
木虫 (正式写手)
- 应助: 20 (小学生)
- 金币: 2316.5
- 散金: 26
- 红花: 4
- 帖子: 390
- 在线: 29.8小时
- 虫号: 830319
- 注册: 2009-08-18
- 性别: GG
- 专业: 基因表达调控与表观遗传学
2楼2010-03-04 17:13:24
muchong5577
金虫 (正式写手)
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 929.2
- 散金: 67
- 红花: 3
- 帖子: 675
- 在线: 136.6小时
- 虫号: 703384
- 注册: 2009-02-18
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
3楼2010-03-04 21:28:57
dy_414
木虫 (正式写手)
- 应助: 20 (小学生)
- 金币: 2316.5
- 散金: 26
- 红花: 4
- 帖子: 390
- 在线: 29.8小时
- 虫号: 830319
- 注册: 2009-08-18
- 性别: GG
- 专业: 基因表达调控与表观遗传学
4楼2010-03-04 22:37:23
| 再顶一下 |
5楼2010-03-05 09:58:56
6楼2010-03-05 10:51:37
7楼2010-03-05 11:53:21
dy_414
木虫 (正式写手)
- 应助: 20 (小学生)
- 金币: 2316.5
- 散金: 26
- 红花: 4
- 帖子: 390
- 在线: 29.8小时
- 虫号: 830319
- 注册: 2009-08-18
- 性别: GG
- 专业: 基因表达调控与表观遗传学
8楼2010-03-05 15:57:19
dy_414
木虫 (正式写手)
- 应助: 20 (小学生)
- 金币: 2316.5
- 散金: 26
- 红花: 4
- 帖子: 390
- 在线: 29.8小时
- 虫号: 830319
- 注册: 2009-08-18
- 性别: GG
- 专业: 基因表达调控与表观遗传学
9楼2010-03-05 15:57:40
dy_414
木虫 (正式写手)
- 应助: 20 (小学生)
- 金币: 2316.5
- 散金: 26
- 红花: 4
- 帖子: 390
- 在线: 29.8小时
- 虫号: 830319
- 注册: 2009-08-18
- 性别: GG
- 专业: 基因表达调控与表观遗传学
10楼2010-03-06 13:25:32
