24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 677  |  回复: 7
当前主题已经存档。
【有奖交流】积极回复本帖子,参与交流,就有机会分得作者 yujiaping1 的 3 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】切胶回收产物克隆后目的片段大小不对

非常奇怪的现象,我都是将PCR产物电泳后切胶回收目的条带,之后检测回收效果,然后进行克隆的,结果质粒回收后酶切发现,有的时候克隆片段的大小和根本不是目的片段的大小,我想知道,这些片段是哪来的。今天遇到的情况更可怕,所以克隆全部不含有目的片段,目的片段在1500bp左右,而回收的片段多数在500bp一下,太奇怪了,这些小片段是哪来的?
有发现类似现象的虫友吗?谁能给我个合理的解释。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by yzhang1986 at 2010-03-04 18:59:35:
目的片段被切了

目的片段被切也不大可能,我用PCR也检测过,结果和酶切结果一样,就是片段变小了,很奇怪,怎么连上小片段的,真是不明原因
8楼2010-03-05 10:48:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

pwj

银虫 (小有名气)

建议好好看下你的目的片段和载体上的酶切位点!
2楼2010-03-04 12:00:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by pwj at 2010-03-04 12:00:19:
建议好好看下你的目的片段和载体上的酶切位点!

我就是使用EcoRI酶切的,载体是PGEM T-easy,很多情况是没有问题的,我说的是特殊情况
3楼2010-03-04 12:36:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

85715623

木虫 (正式写手)

yujiaping1(金币+1): 2010-03-05 10:48
是不是目的基因G+C含量较高的原因啊。
5楼2010-03-04 17:06:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +4 苦命人。。。 2026-04-18 4/200 2026-04-19 02:01 by 烟雨流涯
[考研] 生物学调剂 +10 纸扇zhishan 2026-04-13 10/500 2026-04-18 21:19 by zqndavala
[考研] 297,工科调剂? +5 河南农业大学-能 2026-04-14 5/250 2026-04-18 15:17 by Equinoxhua
[考研] 求调剂 +9 小聂爱学习 2026-04-16 11/550 2026-04-17 22:34 by chixmc
[考研] 322求调剂 +6 tekuzu 2026-04-17 6/300 2026-04-17 13:48 by Espannnnnol
[论文投稿] 有没有接收比较快的sci期刊呀,最好在一个月之内的,研三孩子求毕业 20+4 之护着 2026-04-16 5/250 2026-04-17 10:02 by bobvan
[考博] 申博自荐 +3 Linxia林夏 2026-04-13 3/150 2026-04-16 12:55 by 墨荷之露
[考研] 322求调剂 +8 123安康 2026-04-12 15/750 2026-04-16 11:07 by Espannnnnol
[考研] 327求调剂 +26 Xxjc1107. 2026-04-13 29/1450 2026-04-16 10:52 by Espannnnnol
[考研] 求调剂推荐 +8 小聂爱学习 2026-04-14 8/400 2026-04-16 07:22 by 学员JpLReM
[考研] 通信工程求调剂!!! +6 zlb770521 2026-04-14 6/300 2026-04-15 20:00 by 学员JpLReM
[考研] 药学求调剂 +11 RussHu 2026-04-12 13/650 2026-04-15 19:07 by zhuwenxu
[考研] 0854调剂 +13 长弓傲 2026-04-12 16/800 2026-04-15 13:45 by fenglj492
[教师之家] 转长聘了 +7 简单化xn 2026-04-13 7/350 2026-04-14 14:50 by xindong
[考研] 245求调剂 +6 冰糖橘?汽水 2026-04-13 10/500 2026-04-14 10:49 by jyl0317
[考研] 085600材料与化工329分求调剂 +24 叶zilin 2026-04-13 25/1250 2026-04-14 09:20 by 试管破裂
[考研] 2026硕士调剂_能动_河南农业大学 +4 河南农业大学-能 2026-04-12 4/200 2026-04-13 22:01 by bljnqdcc
[考研] 一志愿中南大学 0855 机械 286 求调剂 +11 不会吃肉 2026-04-12 11/550 2026-04-13 21:59 by bljnqdcc
[考研] 302求调剂 +10 易!? 2026-04-13 10/500 2026-04-13 19:04 by lbsjt
[考研] +10 李多米lee. 2026-04-12 11/550 2026-04-12 22:58 by yuyin1233
信息提示
请填处理意见