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【求助/交流】提取中药毛状根中的RNA
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小女子请教各位我用LICL法提取丹参毛状根中的RNA，提了N次都没有结果。不知道问题出在哪里，现我将我的实验步骤说明如下： 1. EP管，枪头等器具均用DEPC处理过夜，高压灭菌。研钵、玻璃器皿、镊子等在260度高温烘烤8小时。 2.LICL法所用试剂均严格用相关方法配制。玻璃容器均高温烘烤过。 3.在1.5ML EP管中加入700ML 65度预热的RNA提取液，加入约0.1G 毛状根粉末，混合均匀，65度保温10分钟。 4.加入等体积的氯仿抽屉，4度，12000rpm离心10min 5.移出上清液，加入四分之一体积的10mol/L的Licl，4度放置过夜。 6.4度，12000rpm离心30min,弃上清，加入SSTE溶解5分钟，等体积氯仿抽提，加入2倍体积无水乙醇，-70度放置2h 7.4度，12000rpm离心20min,弃上清，沉淀用无水乙醇洗涤一次，超净台放5min,加20ulDEPC处理水，溶解。 8. 1.5%琼脂糖凝胶电泳。 我提了很多次，RNA的两条带都很模糊，有的时候都看不清有害是没有，师兄说是降解了，我好郁闷啊，求求哪位帮帮我 |
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yujiaping1
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