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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】关于颈环状DNA探针
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小qiqi

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】关于颈环状DNA探针

请问颈环状分子信标用一段与环部互补的DNA片段打开以后，条件不变的情况下，除去这段互补片段，分子信标还能恢复成颈环状么？谢谢
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1楼 2010-02-19 16:58:48
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小qiqi

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-02-21 23:44:34:


要不试试T7吧，NEB的资料：

概述
本酶作用于双链 DNA，沿 5´→3´方向催化去除 5´单核苷酸，它既能从 5´末端起始消化，也能从双链 DNA 的切刻或缺口处起始消化(1 ...

哦，谢谢啊，我查一下噬菌体酶
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7楼2010-02-23 00:02:55
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
小qiqi(金币+1): 2010-02-20 10:25
amisking(金币+1): 2010-02-20 10:28
可以，看你怎么控制好温度、pH、盐强度的条件
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2楼2010-02-20 10:11:20
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小qiqi

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-02-20 10:11:20:
可以，看你怎么控制好温度、pH、盐强度的条件

因为这个DNA片段是通过巯基修饰在金电极上，所以条件不能有太大的改变，如果条件不变，能够恢复么？谢谢
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3楼2010-02-20 10:26:38
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
小qiqi(金币+2): 2010-02-21 21:34
amisking(金币+2): 2010-02-21 21:38
引用回帖:
Originally posted by 小qiqi at 2010-02-20 10:26:38:

因为这个DNA片段是通过巯基修饰在金电极上，所以条件不能有太大的改变，如果条件不变，能够恢复么？谢谢

那么杂交的时候就应该先加入外源DNA片段，加热，缓慢降温
去掉的话，就应该加热，洗脱，降温，反复几次以去干净
理论上最后的探针就还是茎环的单链
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4楼2010-02-21 20:46:39
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