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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】关于颈环状DNA探针
汕头大学海洋科学接受调剂
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小qiqi

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】关于颈环状DNA探针

请问颈环状分子信标用一段与环部互补的DNA片段打开以后，条件不变的情况下，除去这段互补片段，分子信标还能恢复成颈环状么？谢谢
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1楼 2010-02-19 16:58:48
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
小qiqi(金币+2): 2010-02-21 21:34
amisking(金币+2): 2010-02-21 21:38
引用回帖:
Originally posted by 小qiqi at 2010-02-20 10:26:38:

因为这个DNA片段是通过巯基修饰在金电极上，所以条件不能有太大的改变，如果条件不变，能够恢复么？谢谢

那么杂交的时候就应该先加入外源DNA片段，加热，缓慢降温
去掉的话，就应该加热，洗脱，降温，反复几次以去干净
理论上最后的探针就还是茎环的单链
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4楼2010-02-21 20:46:39
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
小qiqi(金币+1): 2010-02-20 10:25
amisking(金币+1): 2010-02-20 10:28
可以，看你怎么控制好温度、pH、盐强度的条件
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2楼2010-02-20 10:11:20
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小qiqi

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-02-20 10:11:20:
可以，看你怎么控制好温度、pH、盐强度的条件

因为这个DNA片段是通过巯基修饰在金电极上，所以条件不能有太大的改变，如果条件不变，能够恢复么？谢谢
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3楼2010-02-20 10:26:38
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小qiqi

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-02-21 20:46:39:


那么杂交的时候就应该先加入外源DNA片段，加热，缓慢降温
去掉的话，就应该加热，洗脱，降温，反复几次以去干净
理论上最后的探针就还是茎环的单链

加入的与颈部互补的片段不用改变条件而是用加入核酸外切酶的方式能去掉吗？如果加热的话，颈环状DNA也有可能从电极上解离下来
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5楼2010-02-21 21:36:16
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