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[交流]
【求助/交流】关于颈环状DNA探针
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| 请问颈环状分子信标用一段与环部互补的DNA片段打开以后，条件不变的情况下，除去这段互补片段，分子信标还能恢复成颈环状么？谢谢 |
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小qiqi(金币+1):非常感谢~ 2010-02-23 00:02
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要不试试T7吧，NEB的资料： 概述 本酶作用于双链 DNA，沿 5´→3´方向催化去除 5´单核苷酸，它既能从 5´末端起始消化，也能从双链 DNA 的切刻或缺口处起始消化(1) 。它既能降解 5´磷酸化DNA也能降解5´去磷酸化 DNA。据报道，它能沿 5´→3´方向降解 RNA/DNA 杂交双链上的 RNA 或 DNA，但不能降解双链或单链 RNA(2) 。该酶是 T7 噬菌体基因 6 的产物。 假设电极连着探针的5端，那么有可能形成空间位阻使得酶无法切割探针而只能切外源的DNA，当然具体能否实现你得自己试试了 还有就是，如果不加热而直接进行杂交的话，我觉得成功率会比较低，除非你的环够大同时是线性的，或者经过类似锁核酸LNA修饰以增强刚性，同时你的外源DNA结构也不能太复杂，线性是最好的 |
6楼2010-02-21 23:44:34
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3楼2010-02-20 10:26:38
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4楼2010-02-21 20:46:39