| 查看: 1590 | 回复: 19 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
| 【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 yucheng9255 的 4 个金币 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
yucheng9255木虫 (著名写手)
|
[交流]
【专题】希望大家对我的实验思路提出宝贵意见
|
||
|
老板让我研究野生葡萄中的ALDH基因的表达和功能性分析，该葡萄品种中ALDH基因还没人研究过， 以下是我的实验思路： 1) 通过生物信息学查找所有生物中的ALDH 基因，找出保守序列 2) 通过保守序列设计引物，使用PCR的方法，克隆出一个片段，测序。 3) 根据所克隆片段的序列设计引物，通过RACE的方法，得出序列的3 和5 末端，从而得出ALDH的全长，测序 4) 用RT-PCR的方法，研究ALDH基因在不同组织和时间的表达情况 5) 制备ALDH多克隆抗体，进行Western，验证ALDH酶的在不同时间和组织的表达情况 6) 在逆境条件下，RT-RCR和western 的方法，对ALDH基因和ALDH酶 在不同组织和不同时间的表达情况进行研究 7) 对ALDH进行功能性研究 这种思路正确吗？还有怎么查出所有的ALDH基因？如何找出它们的保守序列？怎么对酶进行功能性研究？希望大家提出宝贵的意见！ 谢谢！！！  |
回复此楼» 猜你喜欢
江苏省自然基金
已经有8人回复
-
生命科学新英文普刊《INVESTIGATION OF LIFE SCIENCE》
已经有13人回复
-
植物学论文润色/翻译怎么收费?
已经有226人回复
-
国际普刊官网征稿INVESTIGATION OF LIFE SCIENCE
已经有8人回复
-
200一版的国际普刊（新刊活动），全流程只需七天
已经有2人回复
-
适合大创赛生科赛结项，学分紧急的同学，国际新刊INVESTIGATION OF LIFE SCIENCE
已经有18人回复
-
INVESTIGATION OF LIFE SCIENCE 第三期开放投稿，审稿快、版面费低
已经有17人回复
-
新审查指南施行半年，AI方向的专利申请是不是更看"技术味"了？
已经有22人回复
-
专利优先审查新办法出了，哪些成果值得走快速预审通道？
已经有33人回复
-
新审查指南堵死了"一案双申"的老路，实用新型和发明只能二选一了？
已经有27人回复
3楼2010-02-09 16:41:56
yucheng9255(金币+5):真是谢谢了 2010-02-09 17:31
|
1) 通过生物信息学查找所有生物中的ALDH 基因，找出保守序列 其实没有必要找所有物种的啦，相近的就可以了，毕竟主要目的就是先得到一段序列 2) 通过保守序列设计引物，使用PCR的方法，克隆出一个片段，测序。 最好用RT-pcr啦，转录本水平做 3) 根据所克隆片段的序列设计引物，通过RACE的方法，得出序列的3 和5 末端，从而得出ALDH的全长，测序 4) 用RT-PCR的方法，研究ALDH基因在不同组织和时间的表达情况 Qpcr 5) 制备ALDH多克隆抗体，进行Western，验证ALDH酶的在不同时间和组织的表达情况 是表达蛋白还是用多肽做？ 表达蛋白的话，又要增加一个步骤了。。。 6) 在逆境条件下，RT-RCR和western 的方法，对ALDH基因和ALDH酶 在不同组织和不同时间的表达情况进行研究 7) 对ALDH进行功能性研究 这一套做下来，，，，好几年过去了 |
4楼2010-02-09 16:49:06
yucheng9255
木虫 (著名写手)
- 应助: 111 (高中生)
- 金币: 1247.5
- 散金: 985
- 红花: 13
- 帖子: 1217
- 在线: 982.9小时
- 虫号: 564716
- 注册: 2008-05-27
- 性别: GG
- 专业: 植物病理学
5楼2010-02-09 17:30:24
6楼2010-02-09 20:02:15
10