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yucheng9255

木虫 (著名写手)

[交流] 【转帖】请问两个同源性较高的基因,怎么通过RT-PCR研究各自的表达情况

我要研究葡萄中ALDH2a 和ALDH2b基因各自在葡萄个组织的表达情况,但是二者的同源性相当高,怎么设计引物能通过RT-PCR来研究二者基因各自的表达情况呢?
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yangym1123

木虫 (小有名气)

★ ★ ★
amisking(金币+3): 2010-02-08 12:24
yucheng9255(金币+1): 2010-02-08 20:17
yucheng9255(金币+1):谢谢 2010-02-08 20:18
同源性高应该指的是编码区吧?可以在非编码区域(3' 5'UTR区域)设计特异引物进行定量或半定量检测。一般情况下基因的非编码区不保守,以前也做过这方面的实验,只能考虑非保守区把这两个基因区分开来!祝你好运!
3楼2010-02-08 12:06:48
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cofe

金虫 (小有名气)

yucheng9255(金币+1):谢谢 2010-02-08 20:17
可以找ORF前段或后端UTR区域设计引物。
2楼2010-02-08 11:57:24
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cyjwx123

铁虫 (小有名气)

yucheng9255(金币+1):谢谢 2010-02-08 20:17
同源性应该是指的是基因表达后的蛋白具有很高的相似性吧。反推过去的话,即2个基因的ORF基本上相同,所以建议你设计引物的话在UTR区域设计会比较好~~
看的开才是真本事~
4楼2010-02-08 13:23:02
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cyjwx123

铁虫 (小有名气)

yucheng9255(金币+1):1 2010-02-08 20:18
还有就是表达量的大小似乎要做real-PCR吧?
看的开才是真本事~
5楼2010-02-08 13:27:06
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