应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】实时荧光定量PCR标准曲线扩增效率问题
51/1返回列表
查看: 1187  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

nankou2008

铁杆木虫 (著名写手)

肥南瓜

[交流] 【求助/交流】实时荧光定量PCR标准曲线扩增效率问题

做实时荧光定量PCR，目的基因和内参基因的标准曲线R2都可以达到0.98以上，但是扩增效率都比较低，不知会是什么原因导致的，有没有什么办法改进？
回复此楼

» 猜你喜欢
湖深而静溪浅而鸣
1楼 2010-01-29 09:28:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)
nankou2008(金币+1):谢谢 2010-01-29 11:26
R方0.98也不算高啊，我们做一般都要0.99以上才好，不过你这个也能凑合用
标准曲线绘制时不要混合太厉害，要现配现用，一般注意这两点，效率可以到0.96以上
赞一下 回复此楼
2楼2010-01-29 10:52:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

地图蜗牛

银虫 (小有名气)
nankou2008(金币+1):谢谢，提高引物浓度可以提高扩增效率吗？ 2010-01-29 11:27
很多原因，尝试优化引物浓度（引物设计也很重要的）；不同公司的试剂也有差异；退火温度也可以调整
赞一下 回复此楼
3楼2010-01-29 11:00:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nankou2008

铁杆木虫 (著名写手)

肥南瓜
引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-01-29 10:52:52:
R方0.98也不算高啊，我们做一般都要0.99以上才好，不过你这个也能凑合用
标准曲线绘制时不要混合太厉害，要现配现用，一般注意这两点，效率可以到0.96以上

我们做的R2可以达到0.99的，只是计算机软件默认的是要大于0.98。“标准曲线绘制时不要混合的太厉害”这句没有理解，能否详细说明下，多谢了！
赞一下 回复此楼
湖深而静溪浅而鸣
4楼2010-01-29 11:25:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujiaping1

木虫 (著名写手)
nankou2008(金币+1):谢谢 2010-02-01 18:19
引用回帖:
Originally posted by nankou2008 at 2010-01-29 11:25:55:


我们做的R2可以达到0.99的，只是计算机软件默认的是要大于0.98。“标准曲线绘制时不要混合的太厉害”这句没有理解，能否详细说明下，多谢了！

就是不能涡旋太久，也不要总用枪来回抽吸，一般轻轻涡旋几下，轻柔短时，三次，就可以了，确定混匀即可，不要长时间剧烈混合
赞一下 回复此楼
5楼2010-01-29 12:46:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 nankou2008 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 3/150 2026-09-20 01:27 by 9i7PCSZyMzot
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 3/150 2026-09-20 01:27 by 9i7PCSZyMzot
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 3/150 2026-09-20 01:15 by 9i7PCSZyMzot
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 3/150 2026-09-20 01:03 by 9i7PCSZyMzot
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 3/150 2026-09-20 00:51 by 9i7PCSZyMzot
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 3/150 2026-09-20 00:15 by 9i7PCSZyMzot
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-20 00:03 by 9i7PCSZyMzot
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-19 23:51 by 9i7PCSZyMzot
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-19 23:39 by 9i7PCSZyMzot
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-19 23:27 by 9i7PCSZyMzot
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-19 23:27 by 9i7PCSZyMzot
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-19 23:03 by 9i7PCSZyMzot
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-19 23:03 by 9i7PCSZyMzot
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-18 7/350 2026-09-19 21:03 by 9i7PCSZyMzot
[教师之家] 现代”学阀”该如何界定 +3 iaeyuan 2026-09-19 3/150 2026-09-19 20:52 by 没昵称呀
[基金申请] 国社科系统bug了，是不是要放榜了？ +7 kynobel 2026-09-16 9/450 2026-09-19 14:52 by 接好运婷
[考博] 申博发邮件 +8 Lmengk 2026-09-15 9/450 2026-09-19 09:27 by 中间体超市
[有机交流] 各位大神，目前国内有哪些比较好用的逆合成软件？ 20+3 zapen 2026-09-15 9/450 2026-09-18 18:17 by zapen
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组｜2027级博士研究生招生公告 +7 水士口 2026-09-16 8/400 2026-09-16 13:47 by kkklens
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组招收博士研究生 +8 两三岁ss 2026-09-14 8/400 2026-09-16 09:46 by 水士口
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭