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monkey514

至尊木虫 (知名作家)

多重人格的虫子

[交流] 【求助】茚三酮检测方法 已有2人参与

各位高手,我现在有一批多糖样品需要测定其中的蛋白质,只是想用茚三酮方法定性一下哪几个样品里面有蛋白质(定性检测一下即可),我现在想请教一下茚三酮试剂的配置方法以及反应时的条件(反应温度、时间等),样品用量,如果其中还需要加入缓冲液的话还希望高手能提供缓冲液的配制方法,如果出现阳性反应的话会是什么现象
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yujian8608

木虫 (职业作家)

平常心,平常心!

★ ★
monkey514(金币+1):谢谢参与
zeng1986kai(金币+1):谢谢应助! 2010-05-18 20:32:00
茚三酮溶于无水乙醇中
检测时需要加热到110度
有容乃大,无欲则刚。容是别人,欲是自己。
6楼2010-05-11 22:34:03
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cherbim

银虫 (小有名气)

★ ★
monkey514(金币+1):谢谢参与
zeng1986kai(金币+1):谢谢应助! 2010-05-18 20:31:38
此反应的适宜pH为5~7,同一浓度的蛋白质或氨基酸在不同pH条件下的颜色深浅不同,酸度过大时甚至不显色。
2楼2010-01-22 14:48:01
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bewin29

木虫 (正式写手)

水镜小生

★ ★
monkey514(金币+1):谢谢参与
zeng1986kai(金币+1):谢谢应助! 2010-05-18 20:31:42
阳性反应的话就是有显色反应,深浅不一;无色便是阴性
木虫吃的不是木头,是寂寞!
3楼2010-01-22 14:58:26
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cherbim

银虫 (小有名气)

★ ★
zeng1986kai(金币+2):谢谢应助! 2010-05-18 20:31:51
水和茚三酮的配制
组        成        搅拌时间,min        溶液1        溶液2
1.蒸馏水,mL
2.乙酸钠(NaOAc),g
3.冰乙酸(CH3COOH),mL
4.缓冲液总体积,mL
5.pH
6.乙二醛甲醚,mL
7.茚三酮,g
8.TiCl2溶液,mL
9.总体积,mL       




20*
15
10        150
82
25
250
5.5
750
20
1.7
1000        600
328
100
1000
5.5
3000
80
6.8
4000
*为通N2搅拌时间。

[ Last edited by cherbim on 2010-1-22 at 15:01 ]
4楼2010-01-22 15:00:18
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